手把手教你做姬姆萨染色实验
丁香园
姬姆萨染液由天青、伊红组成。染色原理和结果与瑞特染色法基本相同。但本法对细胞核和寄生虫着色较好,结构显示更清晰,而胞质和中性颗粒则着色较差。
STEP 1:将染色的玻片置于玻片架上,浸入盛有蒸馏水的染色缸中。
1 个缸:pH 6.8 10 mmol/l 磷酸钠缓冲液,所配的 25 倍稀释的姬姆萨染液。
3 个缸:蒸馏水。
脱水系列溶液:
①3 个缸:分别盛 50%、70% 和 95% 乙醇。
②2 个缸:盛有无水乙醇。
③3 个缸:盛有二甲苯。
STEP 2:在 25 倍稀释的姬姆萨染液中染玻片 20 s(依染色时间决定染色的强弱),将玻片在水中浸泡 3 次,每次 2 min。
STEP 3:连续用乙醇脱水系列溶液处理,每缸中浸泡 2 min,将玻片移至二甲苯缸中,毎次浸泡 2 min,共 3 次。
STEP 4:在通风橱中,按如下操作压片固定:用一平头镊(拿在左手),从二甲苯中取出一块玻片,夹住磨面端置水平。加 4 滴 Permount 的于另一端(切片所处位置),左手拿一干净的盖玻片,很缓慢地放在载玻片上(在加压片固定介质和盖玻片前,勿使玻片变干,因微小气泡会造成人为假象)。
可以用浩然生物的中性树胶。此中型树胶与加拿大树胶相同,是一种天然树脂,经提炼与中和后溶解在二甲苯中成 60% 溶液,折光率与玻璃近似,干燥后凝结成透明无色的固体,没有收缩变黄、纹裂等弊病,没有像加拿大树脂年久变黄切片氧化退色等缺点。
许多整装标本如吸血虫、绦虫等寄生虫用中型树胶封固,均能取得优良效果。