🔥 细胞辐照培养

细胞辐照指的是用 X 射线，B、y 射线等电离射线来辐射细胞的过程。

辐照形成带电荷的颗粒或离子改变了 DNA 从而使淋巴细胞失去增殖能力，但仍具有刺激能力。

细胞辐照会延长细胞周期，诱导染色体畸变，从而使组织、细胞受到损伤对于部分增殖过快的细胞，辐照可延缓其增殖速度。

细胞培养皿、移液枪、移液管

胎牛血清（FBS）、1640 培养基、辐照仪

1. 细胞培养

1）从液氮罐拿出保种细胞，迅速放到 37 ℃ 水浴锅中，不停轻轻摇动加速细胞溶解。

2）将细胞悬液与 5 mL 配好的培养基在 15 mL 离心管中混匀，1200 rpm，离心 3 mins。

3）弃上清，使用 10 mL 培养基将细胞团块重悬，加入 10 cm 细胞培养皿，放入 37 ℃ 恒温培养箱中培养。

2. 待细胞状态良好时，根据实验要求，进行不同剂量的细胞辐照。

辐照仪房间有两个空调，大家在使用前需要打开两个空调，温度已经是设定好了的，只需要打开遥控器即可；辐照仪旁边有一个除湿仪，大家在使用前需要先查看一下除湿仪，如果显示水满需要将水倒掉（辐照仪房间对面那间房间有水槽可以用来倒水）。

1）将钥匙插入，待仪器开机，屏幕显示如图 1 界面，点击 WARM UP，出现图 2 界面，点击 STRART，机器开始预热，大概需要 20 min；

2）预热结束后，出现图 3 界面，点击 MAIN，出现图 4 界面，点击 MANUAL，出现图 5 界面，电压跟电流的参数为固定值，无需更改，只需要将实验所需要的时间更改即可，时间的单位为秒，点击 START 开始辐照。

3. 辐照完成后的细胞，继续放入 37 ℃恒温培养箱中培养。

1. 辐照仪里面顶部有卡槽，用来放铜板，总共有三块铜板，可根据辐照需求自行选择；

2. 在辐照时，要确定门关好，状态为门把手处于竖直状态，如图 6 所示，预热时同样如此，如果门没关好进行预热或辐照操作，机器会显示程序错误；

3. 机器在当天最后一个人使用完后要等机器散热结束关机，将钥匙自行归还。钥匙一般放在 234 房间进门右手边靠近柜子的那一列抽屉的第三个抽屉里；

4. 辐照仪里面共有 5 个 level，一般辐照小鼠在 level 1，加三个铜板，不加反射体（就是那个很沉的黑框），根据辐照剂量计算所需要的辐照时间；辐照细胞一般在 level 3，加一个铜板或者不加铜板，根据辐照剂量计算所需要的辐照时间。

1. 辐照后细胞大量死亡，说明辐射太强；

2. 设置好对照组，射线强度梯度。