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五、小鼠繁育篇:重度免疫缺陷品系 NCG 的繁育问题

相关实验:小鼠饲养繁育

最新修订时间:

材料与仪器

步骤

常见问题

NCG 及 NCG 相关背景品系是重度免疫缺陷模型,对病原体易感,对饲养环境的要求很高,需要在 SPF 级屏障设施内饲养。饲养环境清洁消毒不足,会造成环境微生物富集,对这一类小鼠带来健康风险。小鼠的个体差异、身体机能差异、应激反应、饲养环境的改变等,可能会造成条件性致病菌侵袭,进而引起肠系膜变薄、肠屏障破坏、促使肠道菌群移位、引起肝脏和脾脏等脏器感染。在繁育过程中,小鼠也可能会因产仔、交配等原因,造成泌尿、生殖系统感染。这些因素都可能会造成小鼠的状态不佳甚至死亡。建议这一类小鼠严格控制饲养在屏障环境中,并保持饲养环境的卫生,小鼠接触的所有物料都保证彻底灭菌。

饲养注意事项:

1、动物饮水、饲料、垫料、笼具保证使用前无菌。

2、抓取小鼠时用消毒过的镊子夹取或者用酒精消毒双手后抓取。

3、根据设施情况定期消毒操作:饲养间每周进行一次喷雾消毒(3% 高乐士/2% 过氧乙酸)。

4、日常加强操作加强无菌意识,涉及笼位整理时尽量减少不同笼架交叉操作。

5、个人防护要求:发帽、连体净化服、口罩、双层手套,避免或减少皮肤暴露在外。

6、根据鼠笼饲养密度增加换笼频率,推荐每周换笼(若个别笼盒较脏,可提前换笼),防止共生微生物的富集,对小鼠带来感染的可能(如若有死亡老鼠及时挑出,避免滋生细菌感染)。

7、尽量有单独的饲养房间,与常规品系分开饲养,并加强微生物监测。某些病原在免疫正常小鼠多为隐性,而感染免疫缺陷鼠后,会导致明显症状甚至死亡,比如鼠肝炎、牛棒状杆菌等病原。

8、保持笼架独立性,尽量减少小鼠的挪动。

9、留意监测环境指标。鼠笼温度控制在 23±1 ℃,房间温度控制在 23±2 ℃,鼠笼湿度控制在 40%-70%,湿度较高时,更利于细菌的繁殖和传播,比如绿脓杆菌的扩散就比较依赖潮湿环境;压差、空气洁净度等指标也会影响设施微生物情况;另外饲养室内无操作时,关闭相应笼架位置的日光灯,保留鼠灯,人员操作也需轻柔,留意噪声(低于 60dB)。

10、3-4 周 NCG 小鼠,上架后注意观察会不会饮水,大周龄鼠操作后重新上也会出现不会喝水情况,需要人为的引导,比如在小鼠面前用手轻触饮水嘴。

11、针对 6w 以上或者出现打架等情况的 NCG 小鼠,可选择减少饲养密度,或者在饲养笼盒里面放玩具,减少打架、过度理毛等情况。

幼龄小鼠炸毛:

饲养环境、运输应激和脱水等都有可能会造成 NCG 小鼠炸毛的发生,分笼、新接小鼠时,建议适应性饲养 5-7天,必要时辅助饮食(笼盒内放置少量碎饲料)、辅助饮水(笼盒内放置无菌的代水凝胶或果冻),炸毛情况基本都会缓解。小鼠周龄越小,对运输应激的反应越大,建议运输 5W 左右小鼠,适应性饲养一周后开始实验。

药康设施采用自动饮水系统,如更换饮水方式,部分小鼠可能不会饮水,在饲养过程中需要注意观察小鼠的饮水情况,保持饮水嘴处有液体挂滴,必要时辅助饮水(笼盒内放置无菌的代水凝胶或果冻),以避免小鼠发生脱水情况。

饲养中小鼠出现活动差、体重下降、被毛不光泽:

NCG 小鼠毛发相比其它小鼠,色泽本身会存在一些差异,属于正常现象。但如果 NCG 小鼠出现活动差、饮食下降、体重下降和被毛不光泽的情况,需要考虑小鼠饮食和饲养环境因素,如饲养室温湿度、笼盒进风口气流速度及气流量、饮食饮水、微生物控制等。

小鼠死亡:

NCG 动物本身对病原和各类应激比较敏感,许多共生菌、原发损伤后继发感染、皮肤伤口、运输、饲养环境改变等刺激均可能导致动物死亡。即使成熟的饲养条件下也可能会偶发动物死亡,一般为个例,不影响群体其他动物。如果为大量死亡,需按照上述要点逐一进行排查。

来源:丁香实验

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