慢性温和不可预测性应激模型实验(CUMS)
别名:慢性不可预见性动物应激模型,CUMS抑郁症动物模型,慢性不可预测温和应激(CUMS)模型,慢性不可预知性温和应激(CUMS)抑郁模型
最新修订时间:
审核专家 | 李娜硕士
生理学 大连医科大学
原理
慢性不可预知温和应激 (CUMS) 模型实验:体外给予如禁水、禁食、夹尾 冰水游泳、感觉剥夺等刺激,经过 4 周的应激刺激导致受试机体的功能障碍,导致精神性疾病抑郁症的发生。
用途
用于抑郁症动物模型的构建。
慢性不可预知温和应激 (CUMS) 模型 |
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慢性束缚应激抑郁( chronic restraint stress, CRS)模型 |
优点: 应激因素单一,易于操作。 不足: 模型稳定性差,受试动物易产生适应,后期症状出现自发改善。 |
材料与仪器
1. 材料:
1)鼠笼;2)垫料:3)水瓶:4)冰块;5)照明灯;6)蔗糖;6) C57BL / 6J 小鼠;
2. 仪器:
1)制冰机;2)噪音仪器;3)电击箱;4)强迫游泳桶;5)纯水超纯水机一体系统;6)体重秤;
步骤
一、步骤:
1. 受试动物分笼喂养于室温 25 士 2℃ 的室内,12 小时昼夜节律自由进食进水,给与无菌的饲料和干净情洁的饮用水,适应 1-2w 天后, 随机分组,测试并记录受试动物的体重糖水偏爱百分比等基线数据,剔除基线数据显著差异的受试动物;
2. 依据分组,模型组每天随机给予 1-2 个刺激条件,连续进行四周,刺激无规律;
3. 刺激因子包括:45 度倾斜鼠笼7h、禁水 24 h,禁食 24 h,噪声(>80dB)3 h,潮湿垫料 24 h,冰水游泳 5 min,灯光昼夜颠倒 12h,合笼饲养 24h(6只一笼),足底电击 1min;
4. 造模结束进行行为学测量(糖水实验、旷场实验、悬尾实验等),验证模型。
二、应用刺激说明:
1)45 度倾斜鼠笼:7 h, 将鼠笼与水平面倾斜45度角放置;
2)禁水:24 h,剥夺饮水;
3) 禁食:24h,剥夺饮食;
4)噪声:3 h,高中音量,类似蛇音(>80 dB);
5)潮湿垫料:24 h,向鼠笼中倒入清水,使垫料湿润,以水位漫过垫料表面为度,维持浸湿状态 24h,24h 后更换清洁垫料;
6)冰水游泳:5 min,将受试动物放入温度调至 4℃ 的水中, 受试动物的脚尖刚好能触及到桶底, 5min 后将动物取出。
7)灯光昼夜颠倒:12h,天黑开灯照明;
8)合笼饲养:24h,6 只一笼,正常单独但笼饲养;
9)足底电击: 1min,受试动物置于电击箱,持续 1min。
三、糖水偏好实验(Sucrose preference test)
测量剥夺饮水后受试动物1h内的糖水和自来水消耗量(糖水和自来水双瓶供饮),计算获得相对糖水消耗量(糖水消耗/体重× 100g )以及糖水偏好百分比(糖水消耗量/总液体消耗× 100% ),取三次测试平均值作为糖水测试基础值。
具体步骤:
1)所有动物受训饮用 1% 的蔗糖水,开始 48h内,将训练受试动物适应含糖饮水,将受试动物暴露于 1 瓶为1% 的蔗糖溶液, 另一瓶为清水;
2)禁水禁食 20h 后。 给与每只受试动物定量好的两瓶水:1 瓶1%蔗糖水、1 瓶清水, 饮水 1 h。 然后通过称取饮水瓶的重量。计算获得相对糖水消耗量(糖水消耗/体重× 100%)以及糖水偏好百分比(糖水消耗量/总液体消耗× 100%),取三次测试平均值作为糖水测试基础值。
注意事项
1. 随机给予刺激,连续两次刺激不能相同,使受试动物不能预料刺激的发生;
2. 受试动物饲养空间隔音且足够大;
3. 给予冰水游泳刺激时注意防止受试动物淹溺;
4. 固定实验人员进行实验操作。
常见问题
模型组和对照组无差异:
1)刺激时间造模不够,适当延长造模时间;
2)进行造模实验时,为了避免相互影响,应该尽量单笼饲养;
3)随机时间随机给予刺激因子,避免动物产生适应性。
来源:丁香实验