简介
为了观察单个完整细胞的形态结构,如导管分子、纤维或薄壁组织细胞,可用强酸、强碱或酶将细胞之间的果胶质胞间层溶解,使细胞彼此分离成单个细胞,此制片方法称为离析法。
材料与仪器
器材:小刀、小铁锤、剪刀、小烧杯、恒温培养箱、滴管或玻璃棒、载玻片、盖玻片、镊子和解剖针
试剂:
① 茎或根等木材
② 离析液(10% 硝酸 + 10% 铬酸)
③ 清水(乙醇或染料等)
④ 蒸馏水
步骤
木材的离析制片法的基本过程可分为如下几步:
(一)取材
将茎或根等材料用小刀削去木质部以外的部分,切成火柴梗粗细、长约 1 cm 的小条,或用小铁锤敲击至扁平而松软。然后剪成长约 1 cm 的小段。
(二)离析
将材料浸入盛有离析液(10% 硝酸+10% 铭酸)的小烧杯中,置于 40℃ 恒温培养箱中,视材料的不同,处理时间为 4 h 至 3d。
在离析处理过程中,适时用滴管或玻璃棒取少许材料于载玻片上,加水 1 滴,盖上盖玻片,以滴管的橡胶头轻轻敲击,若材料较易分散即说明浸渍时间已够。如果浸渍时间不足,可更换新鲜的离析液处理至适度。
离析处理完毕,倾出烧杯中的离析液,用蒸馏水浸洗已离析好的材料,反复多次,直至浸出液不呈黄色为止。将材料转入 70% 乙醇中保存,备用。
需要时,取少量材料于载玻片上,加水 1 滴,用镊子和解剖针使其进一步分离为极细的丝状,而后加盖玻片封片,置于显微镜下观察。
来源:丁香实验