简介
整体透明制片法是用透明剂使整块组织变为透明,直接显示其内部结构的方法。具有操作过程简单、快速,尤其是在真实性、整体性和立体观察等方面具有独到之处。较小的材料经透明处理后可直接封片用于显微观察,也可染色后再观察。常用透明剂有乳酸酚溶液(苯酚 10 g,蒸馏水 10 mL,乳酸 10 mL,甘油 10 mL)及 2%~10% 的氢氧化钾溶液、水合氯醛等,乳酸酚溶液适用于比较小而柔软的材料,氢氧化钾溶液则适用于稍大或稍硬的材料。
材料与仪器
器材:酒精灯、载玻片、盖玻片、剪刀、显微镜
试剂:
① 新鲜的水稻或小麦,或其他植物的子房;
② FAA 或卡诺固定液;
③ 各级乙醇(70%、85%、95%、100%);
④ 水杨酸甲酯;
⑤ 苏木精。
步骤
子房整体透明法的基本过程可分为如下几步:
(一)取材与固定
将新鲜的水稻或小麦,或其他植物的子房剥出后直接投入 FAA 或卡诺固定液中,24 h 后转入 70% 的乙醇中备用。
(二)脱水
各级乙醇脱水,浓度为 70%→85%→95%→100%(两次),每级脱水 2~3 h。
(三)透明、装片
将材料放入水杨酸甲酯(methyl salicylate)中 1~2 d,可根据子房的大小适当缩短或延长透明时间,取透明后的子房置于凹玻片或普通载玻片上,在干涉差或相差显微镜下观察和拍照。也可在脱水透明前用稀释的苏木精浅染 5~10 min,经各级乙醇脱水后,放入水杨酸甲酯中透明 1~2 d,在明视野显微镜下观察。
来源:丁香实验