简介
整体透明制片法是用透明剂使整块组织变为透明,直接显示其内部结构的方法。具有操作过程简单、快速,尤其是在真实性、整体性和立体观察等方面具有独到之处。较小的材料经透明处理后可直接封片用于显微观察,也可染色后再观察。常用透明剂有乳酸酚溶液(苯酚 10 g,蒸馏水 10 mL,乳酸 10 mL,甘油 10 mL)及 2%~10% 的氢氧化钾溶液、水合氯醛等,乳酸酚溶液适用于比较小而柔软的材料,氢氧化钾溶液则适用于稍大或稍硬的材料。
材料与仪器
器材:酒精灯、载玻片、盖玻片、剪刀、显微镜
试剂:
① 植物根尖;
② 乳酸酚。
步骤
乳酸酚透明法制作根尖整体透明封片的基本过程可分为如下几步:
(一)取材
剪取植物的根尖(长 5~10 mm),置于载玻片上。若需染色,可在透明前进行。
(二)透明处理
加 1 滴乳酸酚溶液于材料上,手持载玻片在酒精灯上稍稍加热,让透明剂慢慢渗透而使材料变得透明。加热时注意掌握温度,可一边加热一边用手指触摸载玻片,感觉到微微发烫即可,勿使材料变干。
(三)封片
轻轻盖上盖玻片,对较细的根尖材料,不必再在盖玻片上施加压力。若透明剂挥发过多,可适当添加乳酸酚溶液再封片。
若釆用氢氧化钾透明法,先将材料浸入盛有氢氧化钾溶液小瓶中处理 0.5 h 至数小时。若材料较硬,则需置于 40~50 ℃ 温箱中处理 24 h 以上。处理完毕,再用蒸馏水漂洗,然后可进行染色、封片。
来源:丁香实验