氯化三苯基四氮嗖（TTC）法测定种子生活力

植物种子的生活力是指种子发芽的潜在能力，或种胚具有的生活能力。种子的生活力是种子的农艺性状、储藏和加工质量的重要指标之一，常常在进行批量检验、良种等级和播种量确定时要求快速准确测定种子生活力。以生活力代表发芽潜力并与发芽率一致，这对农业生产和经营产业尤为重要，而直接发芽法需要时间长，可能遇到休眠种子无法确定的缺陷。

氯化三苯基四氮嗖（TTC）法测定种子生活力的基本原理是凡有生活力的种胚在呼吸作用过程中都有氧化还原反应，而无生活力的种胚则无此反应。当 TTC 溶液渗入种胚的活细胞内，并作为氢受体被脱氢辅酶（NADH₂ 或 NADPH₂）还原时，可产生红色的三苯基甲腊（TTF），胚便染成红色。当种胚生活力下降时，呼吸作用明显减弱，脱氢酶的活性亦大大下降，胚的颜色变化明显，故可由染色的程度推知种子的生活力强弱。TTC 还原反应如下：

器材：培养皿、镶子、单面刀片、垫板（切种子用）、烧杯、棕色试剂瓶、解剖针、搪瓷盘、pH 试纸、恒温箱、天平、滤纸、漏斗、紫外荧光灯等。

试剂：

① 玉米、小麦、水稻、高粱、油菜、棉花、养麦、墓麻、花生、甜菜、白菜、大麻、向日葵、 大豆、菜豆、亚麻、二叶草等各类植物种子。

② TTC 溶液的配制：取 3 g TTC 溶于 1 L 蒸馏水或冷开水中（如不易溶解，可先加少量酒精，使其溶解后再加水），配制成 0.1% 的 TTC 溶液，pH 6.5~7.5。

氯化三苯基四氮嗖（TTC）法测定种子生活力的基本过程可分为如下几步：

（一）将玉米、小麦等作物的新种子、陈种子或死种子，用温水（30 ℃）浸泡 2~6 h，使种子充分吸胀。

（二）随机取种子 2 份，每份 50 粒，沿种胚中央准确切开，取每粒种子的一半备用。

（三）把切好的种子分别放在培养皿中，加 TTC 溶液，以浸没种子为度。

（四）将种子放入 30~35℃ 的恒温箱内保温 30 min。 也可在 20 ℃ 左右的室温下放置 40~60 min。

1. TTC 溶液最好现用现配，如需贮藏则应贮于棕色瓶中. 放在阴凉黑暗处，如溶液变红 则不可再用。

2. TTC 法染色温度一般以 25~35 ℃ 为宜，显色结束后，要立即鉴定，放久会褪色。

3. TTC 法对于不同作物种子生活力的测定，所需试剂浓度、浸泡时间、染色时间不同。

（五）保温后，倾出药液，用自来水冲洗 2~3 次，立即观察种胚着色情况，判断种子有无生活力，把判断结果记入表 1-1 中。