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家兔肝性脑病法

相关实验:肝功能不全实验

最新修订时间:

简介

家兔肝性脑病法是基于肝性脑病继发于严重肝脏疾病和(或)门体侧支循环形成的疾病所引起的神经精神综合征。

原理

家兔肝性脑病法的基本原理是采用家兔肝大部结扎术造成肝解毒功能急剧降低,在此基础上经十二指肠注入复方氯化铵溶液,致使家兔血氨迅速升高,并出现震颤、抽搐、昏迷等类似肝性脑病症状,同时记录出现相应症状时所用的氯化铵剂量和时间。通过与对照组家兔比较,证明氨在肝性脑病发生机制中的重要作用及肝脏在解氨毒当中的重要地位。

用途

家兔肝性脑病法可用于了解谷氨酸钠是针对氨中毒的一种基本治疗用药,探讨其治疗的病理生理基础。

材料与仪器

器材:

兔台,兔手术器械,粗棉线,细导尿管,纱布,缝合线,滴定架(配上下固定夹),100 mL 输液瓶,5 mL、10 mL 注射器及针头,婴儿秤。


试剂:


①1% 普鲁卡因溶液;


②2.5% 复方氯化铵溶液(NH4C1 25 g、NaHCO315 g,以 5% 葡萄糖溶液定容至 1L);


③2.5% 复方谷氨酸钠溶液(谷氨酸钠 25 g、NaHCO315 g,以 5% 葡萄糖溶液定容至 1L);


④生理盐水。

步骤

家兔肝性脑病法的基本过程可分为如下几步:


(一)实验组


甲兔(肝叶大部结扎+肠腔注入复方氯化铵溶液)。


A. 取健康成年家兔一只,称重后仰卧位固定于兔实验台上,颈前部及上腹部剪毛,在上腹部正中用 1% 普鲁卡因局部浸润麻醉。


B. 肝叶的游离和结扎:自胸骨剑突下正中切口,长 6~8 cm,打开腹腔,即可见位于右季肋区肝脏的边缘。术者左手食指和中指在镰状韧带两侧将肝脏往下压,右手持剪刀剪断肝与膈肌之间的镰状韧带。然后下压、下拉肝脏,再将肝叶翻向上方,用手剥离肝胃韧带,辨明肝脏各叶后(图 14-1),用蘸过生理盐水的粗棉线结扎肝左外叶、左中叶、右中叶及方形叶的根部,使上述肝叶迅速变成暗褐色。由于供应右外叶及尾状叶的门脉血管为独立分支,不会同时被结扎。

C. 十二指肠插管术:沿胃幽门向下找出十二指肠,用小圆缝合针作荷包缝合(图 14-2),然后用眼科剪在荷包中央剪一小口,将细导尿管插入肠腔约 4 cm,收缩荷包结扎固定,将肠管回纳腹腔,检查腹腔内无出血后,关闭腹腔。

D. 观察家兔一般情况、角膜反射及对疼痛刺激反应等。


E. 每隔 5 min 向十二指肠插管中注入复方氯化铵溶液 5 mL,仔细观察动物情况(如有无反应性增强、肌肉痉挛、抽搐等),直至出现全身性抽搐、角弓反张。记录所用复方氯化铵溶液总量,并计算每公斤体重用量。
F. 继续推注复方氯化铵溶液直至家兔死亡,记录存活时间和复方氯化铵溶液剂量。

(二)对照组


A. 乙兔(肝叶假手术+肠腔注入复方氯化铵溶液):乙兔称重后,除肝叶不结扎外,其余操作步骤同甲兔。如前所述每隔 5 min 向肠腔注入复方氯化铵溶液,当推注的氯化铵量(按 mL/mg 计算)达到甲兔出现大抽搐的量时,观察家兔情况并记录;继续推注氯化铵,直至全身性抽搐发作为止,并记录所用复方氯化铵溶液总量及每公斤体重用量。


B. 丙兔(肝叶大部结扎十肠腔注入复方氯化钠溶液):再取一家兔称重后,手术操作同甲兔,术后每隔 5 min 向肠腔注入复方氯化钠溶液 5 mL,观察家兔有无异常,待推注量达甲、乙兔出现抽搐的氯化铵量时,分别观察家兔情况并记录。

(三)治疗组


丁兔(肝叶大部结扎十肠腔注入复方氯化铵溶液十推注复方谷氨酸钠溶液):步骤同实验组(甲兔),肠道内灌注复方氯化铵后待动物出现抽搐症状时,立即自耳缘静脉缓慢注入复方谷氨酸钠溶液 20 mL/kg,观察并记录治疗后症状有无缓解。

注意事项

(1)游离肝脏时,动作宜轻柔,以免肝脏破裂出血。结扎线应扎于肝叶根部,避免拦腰勒破肝脏。


(2)复方氯化铵溶液切勿漏入腹腔。各组推注液体速度、重复推注时间应一致。


(3)手术完毕,肠腔注射氯化铵观察结果时,应将兔撤离兔台,以免出现全身性抽搐时观察不到。


(4)动物性别一致,体重相差不超过 250 g。

来源:丁香实验

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