小鼠构建模型

试剂：

① 雌、孕激素；

② 苯甲酸雌二醇注射液；

③ 黄体酮注射液；

④ 10% 中性甲醛；

⑤ 2.5% 戊二醛；

⑥ 1% 四氧化饿；

⑦ 环氧树脂 618；

⑧ 醋酸铀和枸橼酸铅。

实验动物：成年新西兰雌兔。

小鼠模型构建的基本过程可分为如下几步：

A. 雌、孕激素共同构建: 孕 15 天开始每天颈后皮下注射苯甲酸雌二醇注射液 1.25 mg/kg，黄体酮注射液 75 mg/kg，连续 5 天。孕 20 天孕鼠禁食过夜，次日摘眼球法取血查生化指标。颈椎脱臼处死，取肝右叶组织 1 mm × 1 mm × 1 mm，置于 4 ℃ 下 3 ml 2.5% 戊二醛中固定，取肝右叶组织 1 cm × 1 cm × 0.3 cm，置于 10% 中性甲醛中固定（组织与固定液中体积比为 1:30），行光镜、电镜检查。

B. 单纯雌激素构建模型

（1）孕 12 天开始肌内注射苯甲酸雌二醇，每天 0.35 mg/kg，连续 6 天。孕 17 天采用摘眼球法取血查生化指标。

（2）SD 大鼠，孕 15 天开始每天皮下注射炔雌醇 2.5 mg/kg，连续 5 天。在用药前及用药后 3 天、5 天，分别从眶静脉采全血 2 ml，分娩一只仔鼠后再用同法采血 2 ml，取血清测定各生化指标。分娩一只仔鼠后断头法处死母鼠，即行剖宫手术，观察并记录仔鼠数，包括仔鼠成活数，死胎数，仔鼠体重、身长、尾长，取肝左叶置于 10% 中性甲醛溶液（pH = 7.4）内，固定 24 小时以上，56 ℃ 石蜡包埋，连续切片 6 μm 厚，HE 染色，观察光镜下肝脏的组织学改变。在 0 ℃ 左右的工作台上取肝脏组织块 1 mm × 1 mm × 1 mm，置 2.5% 戊二醛中固定，1% 四氧化饿后固定，乙醇和丙酮递增浓度脱水，环氧树脂 618 包埋，LKB 超薄切片机切片，醋酸铀和枸橼酸铅双染色，用 JEM1200E 型电镜观察。