简介
Masugi 肾炎动物模型,又称肾毒血清性肾炎,是最早在兔体内建立的抗肾小球基底膜(GBM)肾炎,是直接注射异体抗 GBM 抗体诱发的肾炎。
原理
采用异体抗肾小球基底膜(GBM)抗体直接注射,诱发肾炎。
用途
用于需要较多抗血清抗基底膜肾炎的实验研究。
材料与仪器
实验对象:
① 家兔;
② 绵羊。
实验器材:
① 水浴锅。
实验试剂:
① 生理盐水;
② 弗氏完全佐剂。
步骤
Masugi肾炎动物模型的基本过程可分为如下几步:
A. 体重 2~2.5 kg,家兔,不计性别,放血处死取肾,插入动脉导管,用生理盐水反复冲洗后,取兔肾皮质 5 g研成匀浆,与弗氏完全佐剂混合至10 mL,加入生理盐水 20 mL,制成混悬液。
B. 给绵羊皮下或肌内分 5 处注射,每处1 mL,每 2 周 1 次,共 4 次,于末次注射后 2 周,采羊血分离血清,加入经生理盐水洗涤 3 次的等量兔红细胞,混匀,置于 4 ℃ 过夜使之充分吸附,1000 r/min 离心 5 分钟,弃除已被吸附在红细胞上的羊抗兔血液成分抗体,吸取上清液,56 ℃ 水浴 0.5 小时灭活补体备用,即制得羊抗兔肾血清。
C. 取健康的体重 2~2.5 kg,家兔,性别不计,实验前测量 24 小时尿蛋白总量,无异常后,用上述羊抗兔肾血清给家兔耳缘静脉注射,每次 2 mL,每半小时 1 次,共 4 次。一般 1 周内出现蛋白尿。
注意事项
动物免疫时间长,抗体滴度相对较低,但抗血清量大。
来源:丁香实验