简介
被动吸烟法是指吸烟可产生氰化物、一氧化碳、 尼古丁等有害物质,氰化物能抑制细胞色素酶的活性;一氧化碳能降低血红蛋白的氧合能力并抑制碳酸酐酶的活性,影响细胞呼吸;尼古丁作用于凝血因子,使血液成高凝状态周围血管收缩,胎盘灌流量下降,从而使胎盘转运营养物质的功能下降,导致 IUGR 的发生。
用途
为常用的 IUGR 动物模型,其中兔模型是需抽取胎仔血液及研究吸烟对妊娠的影响的理想模型。
材料与仪器
试剂:水合氯醛。
实验动物:
① 雌性新西兰大白兔;
② 成年 Wistar 雌性大鼠。
步骤
被动吸烟法的基本过程可分为如下几步:
A. 兔模型。采用雌性新西兰大白兔,于发情期交配 1 次,交配后第 2 天作为妊娠第 1 天(d1),从妊娠 d2 开始被动吸烟。吸烟在半封闭的动物饲养箱中进行,天分别于上午 10 点、中午 12 点及下午 2 点各吸烟 1 次,每次同时点燃 6 支香烟,动物饲养箱大小为 240 cm × 75 cm × 50 cm,两面安装玻璃,另留上下两个通风口(均为 10 cm × 10 cm)。妊娠于 28 天结束,将孕兔以水合氯醛按 150 mg/kg 腹腔内注射麻醉. 仰卧干手术台上,剖腹取胎,擦干羊水及血液,称量胎仔、胎肝及脑重等。
B. 大鼠模型。成年 Wistar 雌性大鼠,合笼交配,次日取阴道涂片镜检,以发现精子作为妊娠 d0 或 d1。方法如下:
(1)从妊娠 d8 或 d9 起,孕鼠在特制的半封闭动物饲养箱中接受熏烟。每日 3 次,每次 0.3 支烟,持续 15~20 分钟,烟雾浓度约 9 g/cm3。对照组每天与实验组同时半封闭容器内 3 次,不接受熏烟。
(2)自妊娠 d8 或 d9 起,将孕鼠每次 8~10 只放入烟箱中被动吸烟 2 小时,持续至孕 20 天为止。
注意事项
该模型方法较简单,容易制作,但与临床 IUGR 的发生过程有一定差别。动物选择上应注意大鼠孕卵着床时间是交配后的第 5~6 天,妊娠早期吸烟造模可影响孕卵着床导致流产,从而影响造模效果。大白兔被动吸烟模型,可准确安排妊娠时间,母血和胎血均易获取,且容易麻醉和手术。
来源:丁香实验