简介
为研究骨损伤愈合的分子机制,同时尽力排除各种外固定或内固定对骨损伤愈合的影响,很多学者 采用小鼠胫骨和股骨打孔动物模型研究药物或各种蛋白分子在骨折愈合中的作用。该动物模型和小鼠不稳定骨折模型愈合的主要不同点是本实验动物校型无需内外固定,主要以膜内成骨愈合为主,形成的骨痂少。
原理
【小鼠胫骨打孔模型】的基本原理:利用遗传背景相同的近交系小鼠,小鼠胫骨或股骨打孔骨质损伤模型主要通过膜内成骨修复,在此过程中通过加入各种修复干预因子或条件,从而研究骨修复过程中膜内成骨的重要性及其调控机制。
材料与仪器
器材:
① 8 周龄 SPF 级 C57Bl/6J 小鼠
② 11 号圆弧形刀片
③ 钻头
④ 5 ml 注射器
⑥ 7-0 无创缝合线
试剂:
① 0.8% 戊巴比妥钠或阿福汀
② 75% 乙醇
③ 生理盐水
步骤
小鼠胫骨打孔模型的实验基本过程可分为以下几步
A. 8 周龄 SPF 级 C57Bl/6J 小鼠,腹腔注射 0.8% 戊巴比妥钠或阿福汀麻醉小鼠。
B. 75% 乙醇消毒皮肤;用 11 号圆弧形刀片在后肢前外侧离胫骨结节 5 mm 处沿胫骨嵴向远端纵行切开皮肤,长 10~15 mm。
C. 钝性分离肌肉,破坏局部骨膜利用执笔式牙科打磨钻制备胫骨单侧骨皮质 0.8 mm 直径缺损,无需外固定和内固定。
D. 钻头垂直骨面钻取单骨皮质,钻取深度为 0.3~0.4 mm。钻取过程中用 5 ml 注射器连续用生理盐水冲洗打孔处骨碎屑。
E. 游标卡尺测定孔径,生理盐水冲洗伤口, 7-0 无创缝合线缝合皮下软组织,0 号丝线缝合皮肤,术后无需注射抗生素预防感染,伤口每天换药 1 次,持续 3~5 天,直至伤口无明显渗出和红肿等。
F. 术后 1 周、2 周、3 周、4 周利用钼靶 X 线摄片评估骨折愈合过程,并取标本对其修复的病理生理过程进行研究。
来源:丁香实验