简介
ES 细胞被异位移植至皮下时,其发育的遗传程序失控,全能性表现为旺盛的无序的细胞分化,杂乱地排列组成多种类型分化细胞的瘤性组织,这种组织被称之为畸胎瘤。
材料与仪器
器材:
① 载玻片、镊子、离心管、移液管、吸管、35 mm 培养皿(Corning,430165)
② 培养箱
③ 显微镜
试剂:
① ES 细胞、同源动物
② Giemsa(Sigma,G4507)
③ 染色液
④ 甲醇、冰醋酸
步骤
体内分化-畸胎瘤实验验证 ES 细胞多能性的基本过程为:
1.将小鼠 ES 细胞以 10~10/ml 的细胞量离散成悬液。
2.取 0.1~0.2 ml 细胞悬液注射到同源动物的皮下,即接种于同一品系、同一性别的小鼠或免疫缺陷小鼠的腹股沟、眼窝和腹腔。
3.小鼠继续饲养,经过两周之后可见肿块,4~5 周之后处死,剥离肿块,固定,切片,染色,观察。
来源:丁香实验