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体内分化-畸胎瘤实验验证ES细胞多能性

相关实验:小鼠胚胎干细胞分化潜能检测

最新修订时间:

简介

ES 细胞被异位移植至皮下时,其发育的遗传程序失控,全能性表现为旺盛的无序的细胞分化,杂乱地排列组成多种类型分化细胞的瘤性组织,这种组织被称之为畸胎瘤。

材料与仪器

器材:

① 载玻片、镊子、离心管、移液管、吸管、35 mm 培养皿(Corning,430165)

② 培养箱
③ 显微镜

试剂:

① ES 细胞、同源动物
② Giemsa(Sigma,G4507)
③ 染色液
④ 甲醇、冰醋酸

步骤

体内分化-畸胎瘤实验验证 ES 细胞多能性的基本过程为:

1.将小鼠 ES 细胞以 10~10/ml 的细胞量离散成悬液。

2.取 0.1~0.2 ml 细胞悬液注射到同源动物的皮下,即接种于同一品系、同一性别的小鼠或免疫缺陷小鼠的腹股沟、眼窝和腹腔。

3.小鼠继续饲养,经过两周之后可见肿块,4~5 周之后处死,剥离肿块,固定,切片,染色,观察。


来源:丁香实验

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