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家兔精液的冷冻保存

相关实验:家兔配子和卵巢冷冻保存技术

最新修订时间:

简介

将动物精子进行冷冻和低温贮藏是保存动物基因资源的有效方法。冷冻保存动物的精子与活体保存动物相比,可以大大降低实验经费和动物饲养的空间,减少饲养动物可能存在的各种危险。


例如:可以减少由于饲养不当引起的动物死亡、防止动物间疫病的传播、预防由于繁殖等因素引起近交系动保种基因的漂移等。此外,冷冻精子便于运输和进行国际种质交流。

材料与仪器

器材:


①冻存管
②显微镜
③37 ℃水浴锅

④平皿或载玻片


试剂:


①材料:家兔精液
②液氮
③稀释液:0.10 mol/L的蔗糖、0.25 mol/L的Tris、83 mmol/L的枸橼酸钠、3.50 mol/L的DMSO、10% 的卵黄。

步骤

家兔精液的冷冻保存的基本过程可分为如下几步:


1.家兔精液的冷冻


(1)采集家兔精液。水浴把冷冻保存稀释液预热到36 ℃,将稀释液按1:1比例缓慢加入经过品质评定的精液中,边加边轻轻摇晃,使精子与稀释液充分混合。


(2)稀释后的精液用0.25 ml细管分装,置于5 ℃平衡30-60分钟。


(3)将液氮倒入准备好的泡沫箱中,将平衡后的细管放置到距液氮面2~5 cm的铁架上,盖上泡沫箱盖子熏蒸15分钟,然后将冷冻细管迅速投入液氮中保存。


2.家兔精液的复苏


(1)解冻时,将液氮中细管快速取出,投入40~41 ℃水中,30秒后拿出,立即用干纱布吸干包好。


(2)剪开细管两头,滴到预先加温至37 ℃的平皿或载玻片上,镜检并记录精液的活率。

来源:丁香实验

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