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610M多通道血管张力测定仪测量小鼠血管张力

相关实验:小鼠血管张力测量实验

别名:610M Multi Wire Myograph System

最新修订时间:

简介

610M 多通道血管张力测定仪(610M Multi Wire Myograph System):该系统适合 1~4 个小血管同时研究,血管直径为 60 μm~10 mm,特别适用于血管药理学和生理学研究。

原理

610M 多通道血管张力测定仪测量小鼠血管张力的基本原理是通过穿过内腔的两条细小钢丝固定在恒温的含氧生理盐水溶液的小室并监测血管张力的变化。血管在加入不同药物后,收缩舒张的整个过程通过张力传感器输入计算机,并在计算机程序控制下完成记录血管管壁的张力变化。

材料与仪器

器材:

手术器械、膜状内障剪、显微镊、解剖剪、眼科镊、610M 多通道血管张力测定仪(610M Multi Wire Myograph System)。

试剂:

① H-T 缓冲液:NaCl 137 mmol/L;KCI 4 mmol/L;CaCl22 mmol/L;MgCl2 2 mmol/L;葡萄糖 5.6 mmol/L;HEPES 5 mmol/L,中和到 pH7.4。

② KCI H-T 缓冲液:NaCl 15.7 mmol/L;KCI 124 mmol/L;CaCl2 1.0 mmol/L;MgCl2 2.0 mmol/L;葡萄糖 5.6 mmol/ L;HEPES 10 mmol/L,中和到 pH7.4。

步骤

610M 多通道血管张力测定仪测量小鼠血管张力的基本过程可分为如下几步:

A 血管分离将小鼠处死后取出血管组织放在生理溶液中,在解剖镜下将小血管从周围的组织分离出来(注意不要用力过大,以免损伤血管肌肉组织)。

B 将分离干净的血管移到浴槽的生理溶液中,剪取 2~3 cm 的细钢丝(小于浴槽的直径长度以便于操作),用显微镊轻轻夹住血管壁,将细钢丝小心穿入血管内,然后用螺丝刀将钢丝固定在螺丝两侧,以同样的方法穿入另一条钢丝,将血管固定在水浴槽中,如图 8-5-4 所示。
C 打开 Chart 软件,打开氧气和温度开关,在 37 ℃,供氧条件下平衡 30 分钟。

D 基础张力调节平衡至张力曲线水平时,调零。然后通过螺旋测微尺调节血管直径,按照每次 1 μm 的尺度,每隔 1 次/分钟的频率,调至血管壁压力为 13.3 kPa(100 mmHg)时,X1 所示值即为血管基础张力条件下所需内径值,如图 8-5-5a 所示。
E 平衡 20 分钟后,用 KPPS 溶液刺激,连续 3 次,每次之间间隔 10 分钟,刺激信号如图 8-5-5b 所示。

F 平衡 20 分钟后,用实验所需激动剂刺激血管。结果分析如图 8-5-6 所示。

来源:丁香实验

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