简介
尾袖法检测清醒状态下的小鼠血压,但需要待测小鼠在相应设备中适应 1 周左右的时间后进行测量,每天在固定的时间内适应至少 20 分钟,在相同的时间点进行测量。
材料与仪器
器材:系统主机、充放气控制器
充放气控制线、动物笼、脉搏传感器
导引管、通信线、电源线、ALC-NIBP 软件
恒温箱或加温器等(不同型号配置可能不同)
步骤
尾袖法检测小鼠血压的基本过程可分为如下几步,以 ALC-NIBP 无创血压测量分析系统为例:
1. 准备实验
(1)连接系统:
A. 连接系统主机与充放气控制器:充放气控制器上有 ALCBIO 标志的一面向上放置。取充气控制线,一头接充气控制器后面的接口,另一头接主机后面的接口。先要注意接口针芯对准插入,然后旋紧固定圈。
B. 系统主机与计算机连接:将通信线的主机接头端(较方的一头)与主机后面板的 USB 接头连接,注意接头方向吻合,否则会导致仪器损坏。通信线另一头与计算机 USB 接口连接。
C. 接通电源。
D. 连接充放气气路:取充放气管,一头接到充放气控制器前面的气孔,另一头接到固定器的气孔,如果是多通道系统,要将充放气管逐个连接好。
E 脉搏传感器与主机连接:将脉搏传感器的接头端接主机前面板上的信号接口。要先对准后插入,在旋紧固定圈。如果是多通道系统,要将充放气管逐个连接好。
打开主机后面的电源开关,主机前面板上的电源灯亮,表示系统可以开始工作。进行实验前,系统(接好传感器)应预热 20 分钟。预热完成后可以打开应用程序检查系统准备就绪。
(2)定标:
定标是确认压力信号与其通过系统主机中的压力传感器转换后得到的电压之间的比值,定标之后,系统可以根据这个比值,计算血压的准确大小。定标过程包括:
① 使传感器空载,测定传感器空载时候的信号大小。
② 准确给予一个恒定大小的压力标准值,测定此压力时的信号大小。
③ 系统自动计算确定信号转换比值,完成定标。定标时给予传感器的负载标准值应该接近经常用到的血压数值,通常可用 100 mm Hg 定标。ALC-NIBP 系统出厂时已经定标,通常无需再定标即可使用。
由于电子元件的原因,传感器使用一定时间后灵敏度可能会有微小变化,此时应该重新定标,以保证精确地获得实验数据。系统设有定标向导,可根据向导完成定标。
(3)动物适应:
动物紧张会导致血压升高、血压出现较大波动。而且在紧张状态下其尾部血液循环减少,也使脉搏信号不好。捉拿动物要轻柔,尽量减少对动物的刺激,使其保持安静。考虑到血压波动性,尽量在每日相同的时间点测定血压。
注意:正式实验前需要预实验,在一天当中的相同时间点训练动物至少 1 周以上,使其习惯测定装置和操作。测定时要保持环境安静,以避免动物躁动,影响测定结果。
(4)加温:
环境温度较低时,尾动脉脉搏微弱,因此需要对动物加温,以便检测脉搏。用恒温箱时,将动物安置在固定器上,然后将动物连同固定器全部放入恒温箱中,进行测定。恒温箱的温度通常设定在 25~32 ℃,可以根据预实验结果确定使用的温度。
使用的温度应该使动物尾循环良好,脉搏容易检测,而对动物的其他情况影响最小。同一次实验使用一个恒定温度。加温时,只对鼠尾进行加温。使用时将加温器套在鼠尾上,接上电源即可开始加温。
2. 开始实验
A. 启动操作系统。
B. 打开主机电源。
C. 运行 ALC-NIBP 应用程序。
D. 将小鼠头向内放入动物笼中,尾露在外面。
E. 抬起尾固定器的压杆,将装有小鼠动物笼的露尾一侧朝向气囊,放到尾固定器上,用压杆压住动物笼。
F. 将鼠尾引管涂上肥皂水,引导鼠尾从尾固定器的气囊侧穿入,从另一头拉出。
G. 抬起压杆,移动动物笼,使其尽量靠近固定器,同时将鼠尾拉直,使固定器气囊位于鼠尾根部。
注意:鼠尾不要扭转,保持上方静脉垂直向上的姿势。
H. 将脉搏传感器放入固定器中,放入时注意抬起鼠尾。鼠尾的腹面正下方要正对脉搏传感器。
注意事项:脉搏传感器非常敏感,要小心放入,不能挤压传感器表面。
I. 紧固压杆,压住动物笼,确保动物笼不移动。
注意:充放气控制器与尾固定器要放置在同一水平。鼠尾导引管表面一定要涂上润滑剂(如肥皂水),否则可能损坏气囊。穿鼠尾前不要将脉搏传感器放入固定器中。
3. 开始测定
(1)新建任务文件,输入实验名称和测定动物编号。点击「播放」键,各通道中出现信号波形。
(2)轻轻旋动压鼠尾的旋钮,将鼠尾轻轻压在脉搏传感器上。可以从固定器孔查看压尾旋钮与鼠尾被压情况,压尾旋钮压下的程度不要过紧,细心调节压尾旋钮,同时观察脉搏通道的波形,直到检测到良好的脉搏信号。
良好的脉搏信号:脉搏幅度在 ± 1~± 3,波形有规律,稳定。可以通过放大和缩小按键观察波形。脉搏信号本身过小,将影响系统的血压测定结果,观察到良好的脉搏波形信号后,即可以开始测压。
注意事项:温度较低时,测定前应该适当加温,以获得良好的脉搏信号。但是加温温度不宜过高,时间不宜过长,以获得良好的脉搏波形为度。
(3)血压测量:在观察记录至少 10 秒正常脉搏波形后,点击「充气」给尾套充气加压,可见压力通道波形上升,同时可见脉搏通道的脉搏波逐渐减小至消失,脉搏波动消失后继续加压约 20 mm Hg,然后再次点击「充气」键,充气键跳起,停止充气。2~3 秒后点击「放气」,压力下降,脉搏波重新出现。如图 8-5-3 所示。
以上即完成 1 次操作。脉搏完全恢复 10 秒后(不得小于 10 秒,要等脉搏波形平稳),即可再次充气放气测定,测定方法同上。
重复测定数次,最好 4~6 次。充放气控制也可以用「自动实验」进行自动循环测定。
注意事项:将鼠尾摆正;将压尾旋钮调节松紧合适;用固定器固定好之后,测压前等待动物平静 20 分钟。
4. 血压测定结果
(1)选择测定次数:
系统已经自动计算出各次测定结果。用户根据测定时的情况,勾选需要纳入平均的测定次数。对于充气前脉搏波形不稳定、动物躁动、脉搏波形紊乱、脉搏突然过小等影响波形质量的测定结果不予勾选。最好有 4~6 次测定结果,然后取其中结果相差在 5~10 mm Hg 的测定次数。
(2)血压测定结果:
系统将「当前数据分析」中用户选择的各次测定结果的平均值作为本次测定的结果。点击「入数据库」将该次测定结果(即平均值)记入累计数据。
(3)血压人工取值:
人工取值的原理是根据阻断血流时的轴套压力 SBP,取脉搏波消失点对应的压力为 SBP;脉搏波开始减弱点对应的压力为 DBP。
需要注意的是,动物的脉搏波可能在加压后出现波形幅度增大,然后逐渐减小,因此,脉搏波开始减弱点的选取应该与稳定状态下的脉搏波形对比得出。
备注:心率的人工取值方法类同血压取值。数据可以输出为 .txt、Excel 或 Access 格式,图片可以保存为 .bmp 格式图片。
来源:丁香实验