简介
骨骼是一种从体外看不到的组织,但自从 Whilhelm Röntgen 发现了 X 线后,X 线成为一种使得骨骼疾病可视化的强大技术。X 线具有范围在 10 nm~100 pm 的波长,可以穿透软组织,但遇到骨头会有较大的减弱,所以 X 线是获得发育障碍和代谢性骨骼疾病信息的有效技术手段。在几分钟内,整个小鼠的骨架就可以被看到,甚至每一块骨头,每一个关节都清晰可见。
原理
X 线分析实验的基本原理是 X 线具有范围在 10 nm~100 pm 的波长,可以穿透软组织,但遇到骨头会有较大的减弱。
材料与仪器
器材:FaXitron MS20 橱柜式 X 线辐照仪,计算机
步骤
X 线分析实验的基本过程可分为如下几步:
A. 确保相连计算机已经打开。
B. 顺时针旋转仪器钥匙,打开仪器(Ready 绿灯亮为启动成功)。
C. 将 radiation level 设置为 20 kV,Time/AEC 设置为 300 s,点击 Start 仪器预热。
D. 预热结束后双击桌面上 FaXitron SR 图标,启动程序。点击 Start Procedure,并选择「test-Phantom」,点击 Next。
E. 将待测小鼠从动物房转移至测试区域,并对小鼠做好记录。
F. 开始麻醉小鼠,仔细监视动物,直到确保小鼠无意识。
G. 在软件中,点击 Start Procedure,打开新的测量窗口。填写信息窗口:
First Name : 小鼠 ID
Middle Name : 耳标(e.g. : 1 L)
Last Name : 基因型
Patient ID : 小鼠条形码(e.g. : M00002695)
Birth : 出生日期
gender : 性别
点击 Next 选取扫描的分层位置,继续点击 Next 即可开始扫描。
H. 每只小鼠进行 5 次不同方位扫描:全身背部观、全身侧面观、头部侧面观、头部背部观、四肢。
I. 将小鼠按以下方式摆放好
全身背部观:(第一层)将拍照板放置在底层,并确保方形拍照区域位于正中。将小鼠放在拍照区域中,背部向上,头部朝向拍照区域左上角,尾部朝向拍照区域右下角。此时仪器的红色十字光线应照在小鼠背部。此外,需确定背部、颈部已拉直;爪子已远离身体并朝下;尾巴完全位于拍照区域并处于身体左侧且未遮住其他部位(必要时,可用胶带固定)。
全身侧面观:(第一层)将小鼠放在拍照区域中,侧面向上,头部朝向拍照区域左上角,尾部朝向拍照区域右下角。此时仪器的红色十字光线应照在小鼠臀部。此外,确定双肩尽量重合;轻拉右后肢至水平并使脚底板与拍照板呈垂直;左后肢呈自然状态并且脚底板与拍照板呈垂直;尾巴完全位于拍照区域并处于身体背部且未遮住其他部位(必要时,可用胶带固定)。
头部侧面观:(第二层)将小鼠放在拍照区域中,侧面向上,头部位于拍照区域正中。此时仪器的红色十字光线应照在小鼠眼、耳朵之间(垂直线)和平行与口鼻(水平线)。
头部背部观:(第二层)将小鼠放在拍照区域中,背部向上,头部位于拍照区域正中。此时仪器的红色十字光线应照在小鼠头顶,耳朵往上部位。
左前肢腹部观:(顶层)将小鼠放在拍照区域中,左前肢位于拍照区域的左下 1/4 区域内,左前爪位于左上 1/4 区域内。此时确保左肘从躯干伸展开;红色十字光线应照在小鼠耳朵下方。
J. 关上仪器门。
K. 将 radiation level 设置为 20 kV,Time/AEC 设置为 10 s。
L. 点击绿色 start 按钮开始扫描。
M. 拍摄图像后,取出小鼠。把小鼠放在加热垫上,设置在 37 ℃,关在笼子里并密切监察,直至意识完全恢复。
N. 分析图像。结果示例如图 8-10-1 所示。
来源:丁香实验