原理
含铁血黄素是一种血红蛋白源性色素,常规染色为棕黄色大小不等的颗粒,呈点状和团块状分布于细胞内或细胞外。有的存在于血管内。染色反应是由于三价铁离子从蛋白质中被盐酸分离出来,再与亚铁氡化钾反应,生成蓝色的亚铁氰化铁物质,通常用普鲁士(Perls)蓝反应。
材料与仪器
石蜡组织切片
二甲苯 无水乙醇 中性树胶 蒸馏水 铁氰化钾 三氯化铁 中性红 乙酸
滴管 玻片
二甲苯 无水乙醇 中性树胶 蒸馏水 铁氰化钾 三氯化铁 中性红 乙酸
滴管 玻片
步骤
Perls 蓝染色液 20% 盐酸 10 ml,10% 亚铁氰化钾 10 ml,临用时混合。
1. 石蜡组织切片,常规脱蜡至水。
2. Perls 蓝染色液染色 15 min。
3. 蒸馏水洗 2 次,用丽春红-苦味酸染色液染色 3 min。
4. 无水乙醇脱水,二甲苯透明和中性树胶封固。
注意事项
1. Perls 蓝染色液配制时的器皿要清洁,染色液放置 2 h 后不能使用。
2. 丽春红-苦味酸染色液的时间不能长,以免影响对比效果。
常见问题
结果:含铁血黄素呈蓝色,胶原纤维呈红色,背景呈黄色。
来源:丁香实验