β-半乳糖苷酶的测定实验
最新修订时间:
原理
β-D-半乳糖苷半乳糖水解酶。
乳糖+H2O → β-D-半乳糖+D-葡萄糖
<link />材料与仪器
β-半乳糖苷酶
磷酸钾 邻硝基苯基 β-D-半乳糖苷
分光光度计
步骤
实验所需「试剂」具体见「其他」
实验混合物:
以 0.02 ml 酶溶液起始,然后 25℃ 下,在 405 nm处吸收值升高,ε450=3500 l(mol·cm)。
注意事项
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常见问题
试剂:
0.1 mol/L 磷酸钾,pH 7.6
0.05 mol/L 邻硝基苯基 β-D-半乳糖苷(ONPG,Mr=301.3;150 mg 溶于 10 ml 0.1 mol/L 磷酸钾溶液 pH 7.6)
β-半乳糖苷酶提取于 E.coli(约 300 U/mg)
<link />来源:丁香实验