溶菌酶的测定实验
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原理
肽聚糖乙酰胞壁酰脱氢酶,胞壁酸酶。
在肽聚糖中,水解在 N-乙酰胞壁酸和 N-乙酰基-D-葡糖胺残基的 1,4-β-键(这一过程也会弱化几丁质酶的活性)
细菌滕黄微球菌(M.luteus)裂解以后,取混浊液进行酶的实验。
<link />材料与仪器
酶样品
磷酸钾 滕黄微球菌冷冻细胞的悬浊液
分光光度计
步骤
实验所需「试剂」具体见「其他」
0.98 ml 滕黄微球菌悬浊液
0.02 ml 酶样品(大约 500 U/ml)
25℃ 时,记录约 5 min 内,于 45 nm 处吸收值(浑浊)降低。
计算
注意事项
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常见问题
试剂:
0.1 mol/L 磷酸钾 pH 7.0
取滕黄微球菌冷冻细胞的悬浊液 10 mg 溶于 50 ml 0.1 mol/L 磷酸钾溶液 pH 7.0
<link />来源:丁香实验