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pH 稳定计法

最新修订时间:

原理


材料与仪器

胆碱酯酶
​Tris-HCl 氯化乙酰胆碱 氯化镁 NaOH
自动滴定器

步骤


空白对照:保持 pH 7.4,持续记录几分钟每次 0.01 mol/L 氢氧化钠的用量。


样品:加入酶溶液(例如 0.1~1 ml),保持 pH 7.4,并记录 5 min 每次 0.01 mol/L 氢氧化钠的用量。


计算 25℃ pH 7.4 时,每分钟一个单位水解的 1 umol 乙酰胆碱。

常见问题

试剂:


0.02 mol/L Tris-HCl,pH7.4


2.2 mol/L 氯化乙酰胆碱(Mr=181.7;40 g 溶于 100 ml 水中,碘化丁酰胆碱,Mr=301.2)


0.2 mol/L 氯化镁(MgCl·6H2O;Mr=203.3;4.1 g 溶于 100 ml 水中)


0.01 mol/L 氢氧化钠标准溶液作为滴定剂,加入自动滴定器的滴管中


胆喊酯酶,溶于 H2O 中,1 mg/ml

来源:丁香实验

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