原理
胶原纤维是由胶原蛋白聚合与缠绕嫘旋排列而成的,具有双折光性,经过特殊染色后,能够在偏光显微镜下观察到四种不同型的胶原纤维。由于胶原纤维分子中含有碱性氨基酸,能够与酸性染料进行结合反应。常用丽春红-苦味酸(2,4,6-三硝基苯酚)染色法。
材料与仪器
石蜡组织切片
丽春红 S 水溶液 苦味酸饱和液 无水乙醇 二甲苯 中性树胶
过滤纸
丽春红 S 水溶液 苦味酸饱和液 无水乙醇 二甲苯 中性树胶
过滤纸
步骤
丽春红-苦味酸染色液:0.5% 丽春红 S(Ponceau S)水溶液 12 ml,苦味酸饱和液 88 ml。
1. 石蜡组织切片,常规脱蜡至水。
2. 丽春红-苦味酸染色液染色 5 min。
3. 直接用无水乙醇分化与脱水。
4. 用过滤纸吸干。
5. 二甲苯透明和中性树胶封固。
注意事项
1. 丽春红-苦味酸混合液可室温存放,使用滴染方法。
2. 无水乙醇脱水时,应将切片斜放,减少多余水分。
常见问题
结果:胶原纤维呈红色,背景呈黄色。
来源:丁香实验