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L-氨基酸氧化酶的测定实验

最新修订时间:

原理

L-氨基酸:氧氧化还原酶(脱氨基)。


用过氧化物酶(POD)偶联的实验鉴定:


<link />

材料与仪器

酶溶液
三乙醇胺溶液 过氧化氢酶
分光光度计

步骤

实验所需「试剂」具体见「其他」


0.97 ml 三乙醇胺溶液


0.01 ml LDH 过氧化物酶


以 0.02 ml 酶溶液(或者以 H2O 作为对照)起始,随后于 25℃ 436 nm 处吸收值降低约 5 min,ε436=8300 l/(mol·cm)。

注意事项

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常见问题

试剂


0.2 mol/L 三乙醇胺溶液(氯化氢,Mr=185.7;调整至 pH 7.6 并加入 0.1% L-亮氨酸和 0.0065% 邻联二茴香胺)


过氧化物酶(POD,从山葵中提取,使用前用 0.1 mol/L 磷酸钾 pH 7.0 稀释至 120 U/ml)

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来源:丁香实验

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