谷氨酸脱氢酶的测定实验

L-谷氨酸：NAD（P）氧化还原酶（脱氨）。

L-谷氨酸＋NAD（P）^＋＋H₂O ⇌ 2-酮戊二酸＋NAD（P）H＋NH₄^＋

实验适用于逆反应，ADP 刺激反应进行。：

酶样品
咪唑缓冲液 酮戊二酸 乙酸铵 NADH EDTA ADP
分光光度计

实验所需「试剂」具体见「其他」

0.098 ml 实验混合物

0.02 ml LDH 稀释溶液

25℃ 时，于 340 nm 处吸收值降低。NADPH的吸收系数 ε₃₄₀＝6.3×10³ l/（mol·cm）。

试剂：

0.1 mol/L 咪唑缓冲液，pH7.9（咪唑，Mr＝68.1；稀释 0.68 g 于 80 ml H₂O，用 1 mol/L HCl 调节至 pH7.9）

0.2 mol/L 酮戊二酸（2-酮戊二酸，一钠盐，Mr＝168.1，336 mg 溶于 10 ml 水中）

10 mol/L 乙酸铵（Mr＝77.1；0.77 g 溶于 10 ml 水中）

0.01 mol/L NADH（二钠盐，Mr＝709.4；71 mg 溶于 10 ml 水中）

0.1 mol/L EDTA（Mr＝292.2；292 mg 溶于 10 ml 水中）

0.1 mol/L ADP（二钠盐，Mr＝471.2；471 mg 溶于 10 ml 水中）