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分离已知pI 的蛋白质

最新修订时间:

原理

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材料与仪器

含10 mg蛋白质/ml 的溶于水的样品
缓冲液(pH>pI)
50 μm 内径的未包被的融合硅毛细管柱 CE 仪器

步骤


1. 用 pH 高于蛋白质的pI的 5 mmol/L 缓冲液 1/10 (V/F) 稀释蛋白质样品,使蛋白质(终浓度 = 1.0 mg/ml) 产生电荷。另外,也可在 5 mmol/L缓冲液中透析样品(在 1 mg/ml的浓度下)。


2. 用 50 mmol/L 同样缓冲液充满未包被的柱子。


3. 流体动力学地注射样品,如 1 lb/in2 的压力 3 s。


4. 用以下条件进行分离:


探测波长:200 nm

温度:25℃

运行电压:25 kV

运行时间:30 min

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注意事项

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常见问题

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来源:丁香实验

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