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辅助方案 固定

相关实验:细菌透射电镜样品制备实验

最新修订时间:

原理

为了保持菌体的原有形状,常用戊二醛、甲醛、锇酸蒸气等试剂小心固定后再进行染色。

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材料与仪器

菌悬液
固定液(如 pH 7.2 0.15% 的戊二醛磷酸缓冲液) 戊二醛 无菌水 2% 的磷钨酸钠水溶液
冰箱 无菌毛细吸管 无菌滤纸

步骤

1. 将用无菌水制备好的菌悬液经过滤,然后向滤液中加几滴固定液(如 pH 7.2,0.15% 的戊二醛磷酸缓冲液)。


2. 经这样预先稍加固定后,离心,收集菌体,制成菌悬液,


3. 再加几滴新鲜的戊二醛,在室温或 4 ℃ 冰箱内固定过夜。


4. 次日离心,收集菌体,再用无菌水制成菌悬液,并调整细胞浓度为 108~109 个/毫升。


5. 按基本方案所述方法染色。

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注意事项

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常见问题

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来源:丁香实验

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