原理
为了保持菌体的原有形状,常用戊二醛、甲醛、锇酸蒸气等试剂小心固定后再进行染色。
材料与仪器
菌悬液
固定液(如 pH 7.2 0.15% 的戊二醛磷酸缓冲液) 戊二醛 无菌水 2% 的磷钨酸钠水溶液
冰箱 无菌毛细吸管 无菌滤纸
固定液(如 pH 7.2 0.15% 的戊二醛磷酸缓冲液) 戊二醛 无菌水 2% 的磷钨酸钠水溶液
冰箱 无菌毛细吸管 无菌滤纸
步骤
1. 将用无菌水制备好的菌悬液经过滤,然后向滤液中加几滴固定液(如 pH 7.2,0.15% 的戊二醛磷酸缓冲液)。
2. 经这样预先稍加固定后,离心,收集菌体,制成菌悬液,
3. 再加几滴新鲜的戊二醛,在室温或 4 ℃ 冰箱内固定过夜。
4. 次日离心,收集菌体,再用无菌水制成菌悬液,并调整细胞浓度为 108~109 个/毫升。
5. 按基本方案所述方法染色。
来源:丁香实验