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斑点滤膜结合法

相关实验:斑点滤膜结合法测定蛋白质浓度实验

最新修订时间:

原理

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材料与仪器

待测蛋白质样品
10%三氯醋酸(TCA) 考马斯亮蓝凝胶染色液 考马斯亮蓝凝胶脱色液
Whatman 3 MM 滤纸

步骤

1. 用铅笔在 3 mm 滤纸上画出 1 cm x 1 cm 大小的方格;


2. 在每一方格中心加入 3 ul 样品;


3. 将滤纸凉干,大约需要 15 min;


4. 将滤纸浸入 10% TCA 溶液中 30 s(TCA 溶液可重复使用);


5. 用水快速漂洗滤纸;


6. 将滤纸浸入考马斯亮蓝凝胶染液中 30 s(染液可重复使用);


7. 用水快速漂洗滤纸;


8. 在考马斯亮蓝凝胶脱色液中使滤纸脱色,脱色在几分钟之内完成;


9. 通过相应显蓝色的方格,可判断其含有一定量的蛋白质存在。

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注意事项

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常见问题

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来源:丁香实验

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