斑点滤膜结合法测定蛋白质浓度实验

实验分类：

蛋白质实验

最新修订时间：2022-02-10

简介

斑点滤膜结合法是一种初步测定蛋白质含量的快速方法。此法尤其适用于密度梯度离心或柱层析中筛选有用的组分。也可用于指示蛋白峰的存在，以减少进一步进行蛋白定量的样品数。

来源：《蛋白质技术手册》

来源：丁香实验

操作方法

斑点滤膜结合法

1. 用铅笔在 3 mm 滤纸上画出 1 cm x 1 cm 大小的方格；2. 在每一方格中心加入 3 ul 样品；3. 将滤纸凉干，大约需要 15 min；4. 将滤纸浸入 10％ TCA 溶液中 30 s（TCA 溶液可重复使用）；5. 用水快速漂洗滤纸；6. 将滤纸浸入考马斯亮蓝凝胶染液中 30 s（染液可重复使用）；7. 用水快速漂洗滤纸；8. 在考马斯亮蓝凝胶脱色液中使滤纸脱色，脱色在几