丁香实验_LOGO
登录
提问
我要登录
|免费注册
点赞
收藏
wx-share
分享

单次分离

最新修订时间:

原理


材料与仪器

多肽:ACTH 4-10
4:1(V/V)0.5 mol/L 磷酸钠缓冲液(pH 2.50)/乙烯乙二醇 0.1 mol/L 氢氧化钠
150 μm 内径的融合硅毛细管柱 CE 仪器 锥形微量瓶

步骤

1. 制备多肽混合物和预处理柱子(见多次分离步骤 1 和 2)。


2. 在 0.5 lb/in2,10 s 内用低压注射上样 0.1 μl 多肽混合物。


3. 使用以下条件分离多肽混合物:

电解质:0.05 mol/L 磷酸钠缓冲液,pH 2.30

探测波长:200 nm

温度:25℃

电压:7.5 kV

分部大小:每收集管 3 min


4. 用一系列的含 10 μl 4:1(V/V)0.5 mol/L 磷酸钠缓冲液/乙烯乙二醇的微量锥形瓶替换标准的出口池(正极)。收集 3 min 的流分于每一个瓶子用于分析分离的长度。


5. 用分析分离方法(见解析多肽分离实验)筛选含多肽的流分。

注意事项

对于单收集方法,CE仪器必须能有效地控制在高电压水平时的毛细管温度,因为高电压水平是电泳所必需的。鼓风式冷却通常不适合该目的。

来源:丁香实验

提问
扫一扫
丁香实验小程序二维码
实验小助手
丁香实验公众号二维码
扫码领资料
反馈
TOP
打开小程序