材料与仪器
叶绿体
裂解缓冲液
微量离心管 小型离心机
裂解缓冲液
微量离心管 小型离心机
步骤
1. 将含 1 mg 叶绿素的叶绿体悬液吸至一微量离心管中。
2. 在小型离心机中 14000 r/min 离心 30 秒钟,弃去上清。
3. 加 1 ml 裂解缓冲液,振荡,冰浴 5 分钟。
裂解缓冲液:
10 mmol/L HEPES-KOH,pH 8.0
4. 在小型离心机中 14000 r/min 离心 2 分钟,弃去上清(富含基质组分)。
5. 用 1x SH 清洗膜成分,至少洗两次(富含类囊体组分)。
保存液:
20 mmol/L HEPES-KOH,pH 8.0
20 mmol/L 山梨醇
125 mmol/L KCl
含 30% (v/v) DMSO 或 30% 乙二醇
2. 在小型离心机中 14000 r/min 离心 30 秒钟,弃去上清。
3. 加 1 ml 裂解缓冲液,振荡,冰浴 5 分钟。
裂解缓冲液:
10 mmol/L HEPES-KOH,pH 8.0
4. 在小型离心机中 14000 r/min 离心 2 分钟,弃去上清(富含基质组分)。
5. 用 1x SH 清洗膜成分,至少洗两次(富含类囊体组分)。
保存液:
20 mmol/L HEPES-KOH,pH 8.0
20 mmol/L 山梨醇
125 mmol/L KCl
含 30% (v/v) DMSO 或 30% 乙二醇
来源:丁香实验