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从 PEI 沉淀洗脱σ32 和 RNA 聚合酶实验

相关实验:从 PEI 沉淀洗脱 σ32 和 RNA 聚合酶实验

最新修订时间:

材料与仪器

步骤

材料与设备

SDS-PAGE 电泳装置

聚丙烯酰胺小胶(10%)

试剂

缓冲液 A

含 0、0.3、0.5、0.7、0.9 和 1.1mol/LNaCl 的缓冲液 A

(配方,见“试剂的配制”,PP.184~189)

操作程序

1)PEI 悬液(见 p.153) 于离心前取 6X50ul 等分试样。各试样用微型离心机离心 lmin, 然后用 50ul 分别含 0、0.3、0.5、0.7、0.9 和 1.1mol/LNaCl 的缓冲液 A 重悬沉淀物。

2) 充分混匀后静置 10~15mi。再用微型离心机离心 lmin,取上清样品,如需要,进行快速蛋白质斑点印迹试验(见 pp.l72~173) 和 SDS-PAGE 电泳分析。

结果

典型的显示 NaCl 洗脱实验结果的 SDS 凝胶照片,见图 3-5。

来源:丁香实验

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