方案14.7 辐射法分离细胞集落

将培养瓶倒置放于 X 射线机或 ⁶⁰Co 源下，用铅块遮蔽需要的集落。

D-PBS 0.25%胰蛋白酶
生长培养基 X射线或钴源 铅块

1. 选择想要的集落，用毡制粗头笔或 Nikon 标记笔做记号。

2. 选出一块大小适当的铅块。

3. 将培养瓶拿至放射源处。

4. 将培养瓶倒置放于放射源下方。

5. 用 2 mm 厚的铅块（用 2 mm 厚的铅条切出的直径约 2~5 mm 大小的铅块）遮蔽需要的集落。

6. 用 30 Gy 的辐射强度照射培养瓶。

7. 将培养瓶重新放回无菌环境，撤去培养基，胰蛋内酶消化，使细胞在原培养瓶中重新生长。接受辐射的细胞可作为饲养层细胞。

X 射线机或 ⁶⁰Co 源一定要在严格监控下使用， 正确检查以确保自己及他人暴露部位的安全。做此类试验前， 应与地方放射性保护官员取得联系。