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异染颗粒染色配制及革兰氏染色

相关实验:异染颗粒染色配制及染色方法实验

最新修订时间:

原理

用于白喉棒状杆菌染色,异染颗粒可明显地被显示出来,标本直接涂片或细菌涂片均可用改良阿伯特法染色来观察异染颗粒。

材料与仪器

白喉杆菌
甲苯胺兰 孔雀绿 冰醋酸 乙醇
培养基 载玻片

步骤

实验试剂:

甲液:甲苯胺兰:0.15g   孔雀绿:0.2g

冰醋酸:    lml   95%乙醇:2ml

蒸馏水:  100ml

将各染料先溶于乙醇,然后加入水与冰醋酸的混合液中,充分混匀。静置24h后过滤备用

乙液:碘:       2g     碘化钾:3g

蒸馏水:300ml

先将碘化钾加少许蒸馏水(约2ml)充分振摇,待完全溶解,再加入碘,使完全溶解后,加蒸馏水至300ml。

染色法:

1. 涂片经火焰固定,加甲染液染3-5min,水洗。

2. 请加乙液,染1min,水洗。

3. 干后镜检,菌体呈绿色,异染颗粒呈兰黑色。

注意事项

细菌在鸡蛋斜面反复转种后,菌体细长而且比较一致,染色效果好。一般转种3一4次即可。

常见问题

甲、乙二液溢出圈外对染色结果的影响:如果甲液或加人乙液后溢出圈外,染色后菌体呈紫色,其上有数个异染颗粒呈串珠状,对比不清晰。

来源:丁香实验

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