原理
用于白喉棒状杆菌染色,异染颗粒可明显地被显示出来,标本直接涂片或细菌涂片均可用改良阿伯特法染色来观察异染颗粒。
材料与仪器
白喉杆菌
甲苯胺兰 孔雀绿 冰醋酸 乙醇
培养基 载玻片
甲苯胺兰 孔雀绿 冰醋酸 乙醇
培养基 载玻片
步骤
实验试剂:
甲液:甲苯胺兰:0.15g 孔雀绿:0.2g
冰醋酸: lml 95%乙醇:2ml
蒸馏水: 100ml
将各染料先溶于乙醇,然后加入水与冰醋酸的混合液中,充分混匀。静置24h后过滤备用
乙液:碘: 2g 碘化钾:3g
蒸馏水:300ml
先将碘化钾加少许蒸馏水(约2ml)充分振摇,待完全溶解,再加入碘,使完全溶解后,加蒸馏水至300ml。
染色法:
1. 涂片经火焰固定,加甲染液染3-5min,水洗。
2. 请加乙液,染1min,水洗。
3. 干后镜检,菌体呈绿色,异染颗粒呈兰黑色。
甲液:甲苯胺兰:0.15g 孔雀绿:0.2g
冰醋酸: lml 95%乙醇:2ml
蒸馏水: 100ml
将各染料先溶于乙醇,然后加入水与冰醋酸的混合液中,充分混匀。静置24h后过滤备用
乙液:碘: 2g 碘化钾:3g
蒸馏水:300ml
先将碘化钾加少许蒸馏水(约2ml)充分振摇,待完全溶解,再加入碘,使完全溶解后,加蒸馏水至300ml。
染色法:
1. 涂片经火焰固定,加甲染液染3-5min,水洗。
2. 请加乙液,染1min,水洗。
3. 干后镜检,菌体呈绿色,异染颗粒呈兰黑色。
注意事项
细菌在鸡蛋斜面反复转种后,菌体细长而且比较一致,染色效果好。一般转种3一4次即可。
常见问题
甲、乙二液溢出圈外对染色结果的影响:如果甲液或加人乙液后溢出圈外,染色后菌体呈紫色,其上有数个异染颗粒呈串珠状,对比不清晰。
来源:丁香实验