乙酸丙酮法血清甘油三酯测定实验

本法用异丙醇抽提血清TG，氧化铝吸附磷脂及游离甘油氢氧化钾皂化，过碘酸钠氧化生成甲醛，甲醛与乙酸丙酮在氨离子存在下加热生成黄色的 3，5二乙酰-1，4二甲基吡啶〔Hantgsch止反应）显色程度与标本中TG浓度成正比。

一、实验试剂：

1. 异丙醇（分析试剂）

2. 氧化铝（中性、层分用）：用蒸馏水洗数次，倾去不易下沉的细颗粒，吸滤干后在110℃烘箱中活化至少8h，贮存于密闭容器或干燥器中

3. 50g／L 氢氧化钾，内含异丙醇40%

4. 氧化剂：每升中含有无水醋酸铵77g 冰醋酸60ml，过碘酸钠650ml

5. 显色剂：乙酰丙酮0．75ml，异丙醇20ml，用蒸馏水稀释至100ml，贮存棕色瓶内

6，三油酸甘油酯标准液（2．26mmol/l即200g/dl）精确称取纯三油酸甘油酯200mg，用异丙醇配成100ml，紧塞贮4℃冰箱中

二、实验操作：

1. 抽提：方法同胆固醇相同

2. 皂化、氧化，显色、测定管与标准管分别加人相应的抽提液1.0ml，空

白管中加异丙醇lml，各管中加人5Og/LKOH溶液O.2ml皂化，放置60℃水浴15min，冷却后加入氧化剂0.5ml，混匀后加人显色剂O.25ml，再混合，置60℃水浴中20min，取出冷却。

3. 比色：波长410nm 1cm光径比色杯，以空白管调零，读取各管光密度。

三、计算：

血清甘油三酯=测定管吸光度/标准管吸光度×标准浓浓度

1. 本法所用的皂化. 氧化. 显色等试剂都很稳定，在室温中可保存半年，但最好少量分装使用，以减少试剂污染引起空白管色加深．

2. 皂化. 氧化与显色的温度和时间对显色后的吸光度均有影响．因此每批标本都须做好标准管，而不宜从标准曲线查得结果，显色后的吸光度基本稳定，显色放在室温20℃不避光的条件下，吸光度略会增高，但对测定结果影响不大。

3. 甲醛以乙酸丙酮反应产物的吸收峰在415nm，用721型分光光度计时，420nm比色结果满意。

4. 本法回收试验及重复性好，准确性能符合临床要求。