原理
在葡萄糖－6－磷酸（GbB）和NADP存在下，葡萄糖－6－磷酸脱氢酶（G6PD）能使用NADP还原成NADPH，后者在紫外线照射下不会发出荧光。
材料与仪器
G6P NADP HCl
氧化型谷胱甘肽 皂素 蒸馏水
氧化型谷胱甘肽 皂素 蒸馏水
步骤
一、 实验试剂：混合试剂的成人与配方：
0.1mol/L G6P 1ml
7.5mmol/L NADP 1ml 0.7mol/L tris－HCl（PH7.8）3ml
8mmol/L 氧化型谷胱甘肽 1ml
10g/L皂素2ml
蒸馏水2ml
如混合试剂分装后－20℃保存，可稳定数月
二、实验操作：
1. 标本采集：EDTA·Na2H或肝素抗凝全血，若置4℃保存可稳定1周，亦可用肝素化毛细血管从手指或足踉采末梢血液。
2. 取12MM×75MM试管3支，患者．正常（对照）和阳性（对照），血各管加入追合试剂200微升．
3. 向各管分别加入患者正常和阳性的抗凝全血20微升，混合后置25℃室温中。
4. 在反应0／min（混匀后立即吸出）5min和10min时分别从各管吸出反应液1滴，加于新华1号液纸上，使充分干燥．
5. 在暗室内，用波长200-340nm的紫外线照射滤纸上的斑点，检查有无荧光．
6. 正常人的0min斑点无荧光，5min和10min斑点出现荧光，10min斑点荧光最强，G6PD缺陷患者在0min. 5min和10min均无荧光。
三、 实验结果：正常人有甚强的荧光，G6PD缺陷患者荧光很弱或无荧光，杂合于或某些G6PD变异体者则可能有轻度到中度荧光．
0.1mol/L G6P 1ml
7.5mmol/L NADP 1ml 0.7mol/L tris－HCl（PH7.8）3ml
8mmol/L 氧化型谷胱甘肽 1ml
10g/L皂素2ml
蒸馏水2ml
如混合试剂分装后－20℃保存，可稳定数月
二、实验操作：
1. 标本采集：EDTA·Na2H或肝素抗凝全血，若置4℃保存可稳定1周，亦可用肝素化毛细血管从手指或足踉采末梢血液。
2. 取12MM×75MM试管3支，患者．正常（对照）和阳性（对照），血各管加入追合试剂200微升．
3. 向各管分别加入患者正常和阳性的抗凝全血20微升，混合后置25℃室温中。
4. 在反应0／min（混匀后立即吸出）5min和10min时分别从各管吸出反应液1滴，加于新华1号液纸上，使充分干燥．
5. 在暗室内，用波长200-340nm的紫外线照射滤纸上的斑点，检查有无荧光．
6. 正常人的0min斑点无荧光，5min和10min斑点出现荧光，10min斑点荧光最强，G6PD缺陷患者在0min. 5min和10min均无荧光。
三、 实验结果：正常人有甚强的荧光，G6PD缺陷患者荧光很弱或无荧光，杂合于或某些G6PD变异体者则可能有轻度到中度荧光．
注意事项
1. 本法是直接测定；NADPH的量特异性较好．
2. 每次或每批要有G6PD正常和缺陷者的标本作对照．
2. 每次或每批要有G6PD正常和缺陷者的标本作对照．
来源：丁香实验
