原理
用钨酸沉淀尿液中的蛋白质,然后用双缩脲反应进行定量。
材料与仪器
硫酸溶液 钨酸钠溶液 蒸馏水
步骤
一、实验试剂;
1、1.75mmol/L 硫酸溶液
2、15g/L 钨酸钠溶液
3、双缩脲试剂;取硫酸铜(CuSO420)3.0g溶于500ml蒸馏水中加酒石酸钾钠 9.0 gKI 50g使溶,加 6 moL/LNaOH液 100 ml加水到1000 ml混匀.密闭贮存于聚乙烯瓶内。
4、蛋白质标准液(2.0 g/L)用准确定值的混合入血清,以 3 g/L的苯甲酸液作稀释,释成 2.0 g/L的浓度,贮存待用.
二、实验方法:
1、留取 24 h尿液标本,(加甲苯防腐),混合后,记总量,取小量尿液离心用滤纸过滤.
2、先作蛋白质定性+-++在10ml刻度离心管加尿液5ml如(+++-++++)则在管中加尿液lml蒸馏水4ml.
3、加75mmol/L硫酸2.5ml混合.
4、加钨酸钠2.5ml,充分混合静止10分钟
5、离心沉淀5分钟倾去上清,保留沉淀加生理盐水1.0ml混合,为测定管.
6、按下表操作
测定管 标准管
Pr标液 1.0
双缩同试剂(ml) 4.0 4.0
充分混和,37℃水浴30分钟,用540nm处比色,读取SU
三、计算:
24小时尿蛋白总量(g)=(V/S)×50×(0.05/固定管尿量(ml))×(24总尿量/1000)
1、1.75mmol/L 硫酸溶液
2、15g/L 钨酸钠溶液
3、双缩脲试剂;取硫酸铜(CuSO420)3.0g溶于500ml蒸馏水中加酒石酸钾钠 9.0 gKI 50g使溶,加 6 moL/LNaOH液 100 ml加水到1000 ml混匀.密闭贮存于聚乙烯瓶内。
4、蛋白质标准液(2.0 g/L)用准确定值的混合入血清,以 3 g/L的苯甲酸液作稀释,释成 2.0 g/L的浓度,贮存待用.
二、实验方法:
1、留取 24 h尿液标本,(加甲苯防腐),混合后,记总量,取小量尿液离心用滤纸过滤.
2、先作蛋白质定性+-++在10ml刻度离心管加尿液5ml如(+++-++++)则在管中加尿液lml蒸馏水4ml.
3、加75mmol/L硫酸2.5ml混合.
4、加钨酸钠2.5ml,充分混合静止10分钟
5、离心沉淀5分钟倾去上清,保留沉淀加生理盐水1.0ml混合,为测定管.
6、按下表操作
测定管 标准管
Pr标液 1.0
双缩同试剂(ml) 4.0 4.0
充分混和,37℃水浴30分钟,用540nm处比色,读取SU
三、计算:
24小时尿蛋白总量(g)=(V/S)×50×(0.05/固定管尿量(ml))×(24总尿量/1000)
来源:丁香实验