原理
由于网织红细胞胞浆中还残存少量核蛋白体和核糖核酸(DNA)可被某些染料(如煌焦油蓝、新美蓝)染成蓝色颗粒和网状物质。故可区别于完全成熟的红细胞,(feticulocyte直径8-9.5cm)
材料与仪器
血液
新美蓝溶液
显微镜
新美蓝溶液
显微镜
步骤
一、实验试剂:过去用煌焦油蓝,近来国外多用新美蓝溶液,因为后者网状物质着色较深,结果比较恒定,煌焦油蓝染色在不同标本间的差异较大.①、煌焦油蓝溶液:
煌焦油蓝 0.4g 38g/L柠檬酸钠 20.0ml氯化钠 8.5g/L 加水至100ml②、新美蓝溶液:
新美蓝 1.0g 38g/L柠檬酸钠 20.0ml85g/L NaCl 加水至100ml
二、实验操作:
1、于小试管中加2-3滴新美蓝溶液或煌焦油蓝溶液再加血2-3滴,混合加塞。
2、置37℃,15-20min。
3、摇匀,取小滴推成片薄膜,干燥。
4、选用低倍镜选择红细胞散在而分布均匀部位,然后油镜计数。
5、为方便计数,需把视野缩小,可在目镜内放置一圆形硬纸,中央开一约2mm×3mm小孔。
6.网织红细胞是有网状,细小点状或浅状蓝色物质的红细胞,计数1000个红细胞中含有的网织红细胞数,以10除之,即得网织红细胞的百数.
煌焦油蓝 0.4g 38g/L柠檬酸钠 20.0ml氯化钠 8.5g/L 加水至100ml②、新美蓝溶液:
新美蓝 1.0g 38g/L柠檬酸钠 20.0ml85g/L NaCl 加水至100ml
二、实验操作:
1、于小试管中加2-3滴新美蓝溶液或煌焦油蓝溶液再加血2-3滴,混合加塞。
2、置37℃,15-20min。
3、摇匀,取小滴推成片薄膜,干燥。
4、选用低倍镜选择红细胞散在而分布均匀部位,然后油镜计数。
5、为方便计数,需把视野缩小,可在目镜内放置一圆形硬纸,中央开一约2mm×3mm小孔。
6.网织红细胞是有网状,细小点状或浅状蓝色物质的红细胞,计数1000个红细胞中含有的网织红细胞数,以10除之,即得网织红细胞的百数.
注意事项
l、网织红细胞必须在活体,染色条件下才能显示,染色与血液的比例以1:l为宜。
2、血膜制备技术很重要,红细胞应均匀散开,如有重叠则影响结果的准确性。一般选择血膜的体尾交界处进行计数。
参考植:成 人:0.008-0.02或(25-75)×109/L初生儿:0.020-0.06
2、血膜制备技术很重要,红细胞应均匀散开,如有重叠则影响结果的准确性。一般选择血膜的体尾交界处进行计数。
参考植:成 人:0.008-0.02或(25-75)×109/L初生儿:0.020-0.06
来源:丁香实验