原理
当植物缺水时体内的脯氨酸含量增加。植物体内脯氨酸含量在一定程度上反映了植物体内的水分情况，因而可以作为植物缺水情况的参考性生理指标。
用人造沸石(Permutit)在pH1-7范围内振荡溶液可除去干扰的氨基酸或使其不与茚三酮反应（如甘氨酸、谷氨酸、天冬氨酸、丙氨酸、缬氨酸、胱氨酸、苯柄氨酸、精氨酸等），脯氨酸与茚三酮试剂呈显色反应，其含量与颜色的深浅呈正相关，可用分光度计测定。该法有专一性。
用人造沸石(Permutit)在pH1-7范围内振荡溶液可除去干扰的氨基酸或使其不与茚三酮反应（如甘氨酸、谷氨酸、天冬氨酸、丙氨酸、缬氨酸、胱氨酸、苯柄氨酸、精氨酸等），脯氨酸与茚三酮试剂呈显色反应，其含量与颜色的深浅呈正相关，可用分光度计测定。该法有专一性。
材料与仪器
721分光光度计 水浴锅 离心机 移液管 烧杯 容量瓶 研钵 冰醋酸 具塞试管 脯氨酸 80%乙醇 茚三酮试剂
步骤
二、仪器药品
（1）721分光光度计；（2）水浴锅；（3）离心机；（4）移液管；（5）烧杯；（6）容量瓶；（7）研钵；（8）冰醋酸；（9）具塞试管；（10）脯氨酸；（11）80%乙醇；（12）茚三酮试剂：将2.5g茚三酮溶于60ml冰醋酸和40ml 6M磷酸中，加热（70℃）溶解，试剂至少在24小时内稳定。
三、实验步骤
1. 绘制标准曲线
取脯氨酸溶于80%乙醇中，然后稀释成下列浓度：0、1.0、2.5、5.0、7.5、10、15、20、25、30μg/ml。分别取标准溶液2ml，冰醋酸2ml，茚三酮试剂2ml加入试管中，用橡皮塞塞紧，于沸水浴中加热15分钟。用分光光度计于波长515nm下进行比色测定，以浓度0为空白对照。将测定结果以脯氨酸浓度为横坐标，以光密度为纵坐标作标准曲线。
2. 植株样品液的提取
选取植株功能叶片2g，用3ml 80%乙醇研磨（放少许石英砂），成浆状，用80%乙醇洗研钵，将提取物和洗液置于试管中，80%乙醇总量为10ml。加盖置于黑暗中室温下提取24小时或水浴。
将提取液在放有活性炭的滤纸上进行过滤，重复过滤一次，除去色素和残渣。将提取液置于试管中，加其重1/5的人造沸石强烈振荡5分钟。将上层液在离心机上离心10分钟，取上清液备用。
3. 样品溶液的测定
将离心后所得上清液，取2ml置于试管中，再加入2ml冰醋酸和2ml茚三酮试剂，加盖密封，在沸水浴上加热15分钟。用3ml 80%乙醇代替样品液作对照。在分光光度计上用515nm进行比色测定。读出光密度后，从坐标曲线上求出样品溶液中脯氨酸含量。
4. 结果计算：
（1）721分光光度计；（2）水浴锅；（3）离心机；（4）移液管；（5）烧杯；（6）容量瓶；（7）研钵；（8）冰醋酸；（9）具塞试管；（10）脯氨酸；（11）80%乙醇；（12）茚三酮试剂：将2.5g茚三酮溶于60ml冰醋酸和40ml 6M磷酸中，加热（70℃）溶解，试剂至少在24小时内稳定。
三、实验步骤
1. 绘制标准曲线
取脯氨酸溶于80%乙醇中，然后稀释成下列浓度：0、1.0、2.5、5.0、7.5、10、15、20、25、30μg/ml。分别取标准溶液2ml，冰醋酸2ml，茚三酮试剂2ml加入试管中，用橡皮塞塞紧，于沸水浴中加热15分钟。用分光光度计于波长515nm下进行比色测定，以浓度0为空白对照。将测定结果以脯氨酸浓度为横坐标，以光密度为纵坐标作标准曲线。
2. 植株样品液的提取
选取植株功能叶片2g，用3ml 80%乙醇研磨（放少许石英砂），成浆状，用80%乙醇洗研钵，将提取物和洗液置于试管中，80%乙醇总量为10ml。加盖置于黑暗中室温下提取24小时或水浴。
将提取液在放有活性炭的滤纸上进行过滤，重复过滤一次，除去色素和残渣。将提取液置于试管中，加其重1/5的人造沸石强烈振荡5分钟。将上层液在离心机上离心10分钟，取上清液备用。
3. 样品溶液的测定
将离心后所得上清液，取2ml置于试管中，再加入2ml冰醋酸和2ml茚三酮试剂，加盖密封，在沸水浴上加热15分钟。用3ml 80%乙醇代替样品液作对照。在分光光度计上用515nm进行比色测定。读出光密度后，从坐标曲线上求出样品溶液中脯氨酸含量。
4. 结果计算：
来源：丁香实验
