原理
骨为坚硬的结缔组织。显微镜下观察骨磨片的骨组织结构,必须使骨小管和骨陷窝内充满空气而成黑色,这样镜下观察时就能清晰可见,因此封片是制作骨磨片技术的难点之一。骨磨片一般不能用液体树胶封片,因为树胶中二甲苯会使骨小管及骨陷窝透明,结构反而不清晰。为了更好地显示骨组织结构的完整性,并使磨片不易脱落。 制作优良的骨磨片和牙齿磨片,对组织胚胎的教学很为需要。初是将锯下的骨的薄片放于磨石或玻璃板上,加上研磨剂,如用很细的金刚砂或家庭用的去污粉进行湿磨。也可以放于两块毛玻璃板之间研磨或者将薄的骨片放在橡皮或软木塞下。
骨磨片是骨组织的微观形态如哈佛氏管的形状及大小、骨板层次 数目及骨单位等形态特征需用光学显微镜进行检査,因此需要将骨骼制成能够透光、观察内部结构的薄片。其制作方法是先将骨骼 按横切面锯下1.5〜2. 0mm厚的一片,用细 磨刀石均匀磨薄,直至骨片磨成新闻纸样厚 薄为止。然后经过一系列脱水,透明,固定于载玻片上,用显微镜观察所需要的形态特征。
材料与仪器
骨磨片
银染色剂
显微镜
银染色剂
显微镜
步骤
1. 染色:镀银法
2. 肉眼观察:
骨磨片较切片厚,而且厚薄不均匀,观察时应选较薄处。
3. 低倍镜观察:
因标本由干骨制作,故切片中无软组织,主要分辨密质骨中的四种骨板:
(1) 外环骨板:位于骨表面;骨板与骨表面平行排列,层次较多而整齐。
(2)内环骨板:位于骨髓腔面,沿骨髓腔面排列,骨板层次少且厚薄不一。
(3)哈弗斯系统:位于内、外环骨板之间,哈弗斯系统中央为黑褐色的中央管,许多层哈弗斯骨板围绕中央管呈同心圆排列。
(4)间骨扳:位于哈佛斯系统之间,是大小不等、排列不规则的骨板。
4. 高倍镜观察
(1) 骨陷窝:位于骨板间或骨板内,单个分散排列,呈椭圆形,着黑褐色。
(2)骨小管:从骨陷窝向四周伸出的许多放射状小管,着黑褐色,相邻的骨小管相互连接。在哈弗斯系统中,骨小管与中央管相通。
2. 肉眼观察:
骨磨片较切片厚,而且厚薄不均匀,观察时应选较薄处。
3. 低倍镜观察:
因标本由干骨制作,故切片中无软组织,主要分辨密质骨中的四种骨板:
(1) 外环骨板:位于骨表面;骨板与骨表面平行排列,层次较多而整齐。
(2)内环骨板:位于骨髓腔面,沿骨髓腔面排列,骨板层次少且厚薄不一。
(3)哈弗斯系统:位于内、外环骨板之间,哈弗斯系统中央为黑褐色的中央管,许多层哈弗斯骨板围绕中央管呈同心圆排列。
(4)间骨扳:位于哈佛斯系统之间,是大小不等、排列不规则的骨板。
4. 高倍镜观察
(1) 骨陷窝:位于骨板间或骨板内,单个分散排列,呈椭圆形,着黑褐色。
(2)骨小管:从骨陷窝向四周伸出的许多放射状小管,着黑褐色,相邻的骨小管相互连接。在哈弗斯系统中,骨小管与中央管相通。
注意事项
骨磨片较切片厚,而且厚薄不均匀,观察时应选较薄处。
常见问题
本实验来源于贵阳中医学院基础医学实验教学中心网站
来源:丁香实验