原理
浓度系列稀释法时把药物稀释成不同的系列浓度,混入培养基内,加入一定量的试验菌,经适宜温度培养后观察结果,求得药物的最低抑菌浓度(MIC)。
材料与仪器
金黄色葡萄球菌
肉汤培养基 药液
试管 金黄色葡萄球菌 肉汤培养基、药液 刻度移液管
肉汤培养基 药液
试管 金黄色葡萄球菌 肉汤培养基、药液 刻度移液管
步骤
1. 按无菌操作在每管中加入肉汤培养基1ml。
2. 于第1管加入原浓度药液1ml,混匀后吸取1ml加入第2管,同样混匀后吸取1ml加入第3管,依次类推,将药液对倍稀释至第9管后取出1ml弃去。第10管不加药物,作对照。
3. 第1管至第10管各加入上述菌液0.1ml,混匀。
4. 置37℃恒温箱经18~24小时培养后观察各管细菌生长情况。
5. 结果判断:以完全抑制细菌生长的药物最高稀释倍数为该药物对该细菌的最低抑菌浓度(MIC)。
2. 于第1管加入原浓度药液1ml,混匀后吸取1ml加入第2管,同样混匀后吸取1ml加入第3管,依次类推,将药液对倍稀释至第9管后取出1ml弃去。第10管不加药物,作对照。
3. 第1管至第10管各加入上述菌液0.1ml,混匀。
4. 置37℃恒温箱经18~24小时培养后观察各管细菌生长情况。
5. 结果判断:以完全抑制细菌生长的药物最高稀释倍数为该药物对该细菌的最低抑菌浓度(MIC)。
注意事项
1. 稀释的准确性:每稀释一种浓度换一支吸管,较一支吸管稀释到底准确些。
2. 加入菌液的浓度:菌液浓度大时,则最小抑菌浓度药高,反之亦然。
3. 菌龄:一般认为幼龄菌较敏感,所以多用细菌的6小时培养液。
来源:丁香实验