原理
将已知的伤寒杆菌“O”抗原、“H”抗原和甲型、乙型副伤寒杆菌“H”抗原与病人血清混合作试管定量凝集试验，以检测病人血清中的相应抗体，临床上作为诊断伤寒和副伤寒的参考依据。
材料与仪器
待检血清 诊断菌液 蒸馏水 试管 试管架 微量移液器 吸管 水浴箱
步骤
1. 将大小一致的小试管放置试管架，4排，每排8支，作好标记。
2. 在所有32支试管中分别加入生理盐水0.5ml。
3. 另取1支试管，加生理盐水1.8ml和病人血清0.2ml，充分混匀，得到1：10稀释血清。在每排第1管中分别加入该1：10稀释血清0.5ml，充分混匀，即得1：20稀释血清。
4. 对倍稀释病人血清：分别从每排第1管中取0.5ml血清加入本排第2管，混匀，再从第2管吸取0.5ml血清加入第3管，混匀。依次类推，直至每排第7管中加入稀释血清0.5ml，混匀后从每排第7管中吸取0.5ml丢弃。从而每排1～7管得到1：20、1：40、1：80、1：160、1：320、1：640、1：1280的对倍稀释血清。第8管不加血清，只加生理盐水作阴性对照。
5. 加入菌液：各排从第8管开始，由后往前每管加入诊断菌液0.5ml。
第1排各管加入伤寒杆菌“H”菌液。
第2排各管加入伤寒杆菌“O”菌液。
第3排各管加入甲型副伤寒杆菌“H”菌液。
第4排各管加入乙型副伤寒杆菌“H”菌液。
此时，各血清管的血清稀释度又增加了1倍，依次为1：40、1：80、1：160、1：320、1：640、1：1280、1：2560，每管总量为1ml。
2. 在所有32支试管中分别加入生理盐水0.5ml。
3. 另取1支试管，加生理盐水1.8ml和病人血清0.2ml，充分混匀，得到1：10稀释血清。在每排第1管中分别加入该1：10稀释血清0.5ml，充分混匀，即得1：20稀释血清。
4. 对倍稀释病人血清：分别从每排第1管中取0.5ml血清加入本排第2管，混匀，再从第2管吸取0.5ml血清加入第3管，混匀。依次类推，直至每排第7管中加入稀释血清0.5ml，混匀后从每排第7管中吸取0.5ml丢弃。从而每排1～7管得到1：20、1：40、1：80、1：160、1：320、1：640、1：1280的对倍稀释血清。第8管不加血清，只加生理盐水作阴性对照。
5. 加入菌液：各排从第8管开始，由后往前每管加入诊断菌液0.5ml。
第1排各管加入伤寒杆菌“H”菌液。
第2排各管加入伤寒杆菌“O”菌液。
第3排各管加入甲型副伤寒杆菌“H”菌液。
第4排各管加入乙型副伤寒杆菌“H”菌液。
此时，各血清管的血清稀释度又增加了1倍，依次为1：40、1：80、1：160、1：320、1：640、1：1280、1：2560，每管总量为1ml。
常见问题
结果判定与书写
根据凝集反应的强弱，分别用“＋＋＋＋”、“＋＋＋”、“＋＋”、“＋”和“－”表示。
1. ＋＋＋＋：完全凝集，上层液体清澈透亮，细菌完全凝集沉淀于管底。
2. ＋＋＋：大部分凝集，上层液体基本透明，细菌大部分（75%）凝集沉淀于管底。
3. ＋＋：中度凝集，上层液体半透明，管底有明显凝集沉淀物。
4. ＋：弱凝集，上层液体混浊，管底仅有少量凝集沉淀物。
5. －：不凝集，液体呈乳状，管底有明显凝集沉淀物。
判断血清凝集效价：先要看各排对照管，在对照管均不发生凝集时，依次观看各试验管，以出现明显凝集现象（＋＋）的血清最高稀释倍数作为该血清的凝集效价（抗体效价）
根据凝集反应的强弱，分别用“＋＋＋＋”、“＋＋＋”、“＋＋”、“＋”和“－”表示。
1. ＋＋＋＋：完全凝集，上层液体清澈透亮，细菌完全凝集沉淀于管底。
2. ＋＋＋：大部分凝集，上层液体基本透明，细菌大部分（75%）凝集沉淀于管底。
3. ＋＋：中度凝集，上层液体半透明，管底有明显凝集沉淀物。
4. ＋：弱凝集，上层液体混浊，管底仅有少量凝集沉淀物。
5. －：不凝集，液体呈乳状，管底有明显凝集沉淀物。
判断血清凝集效价：先要看各排对照管，在对照管均不发生凝集时，依次观看各试验管，以出现明显凝集现象（＋＋）的血清最高稀释倍数作为该血清的凝集效价（抗体效价）
来源：丁香实验
