原理
肥大细胞的胞质中充满许多粗大的水溶性、嗜碱性和异染性的颗粒,颗粒中含有多巴胺,组胺,肝素。5-羟色胺等活性物质。这些物质中含有多硫酸脂和硫酸黏多糖类,能与异染性染料结合,因此,用中性红、美蓝、甲苯胺蓝等染料处理上皮组织均可将肥大细胞胞质中的水溶性、嗜碱性和异染性的颗粒显示出来。
材料与仪器
成年小鼠
A-F固定液 甲苯胺蓝染色液 的冰醋酸分色液
显微镜 解剖剪 解剖镊子废旧针头 解剖盘 载片 盖片
A-F固定液 甲苯胺蓝染色液 的冰醋酸分色液
显微镜 解剖剪 解剖镊子废旧针头 解剖盘 载片 盖片
步骤
1.小鼠皮下组织铺片制作
(1)断颈法处死小鼠
(2)解剖小鼠取结缔组织
(3)将组织铺于干净的载玻片上,用废旧针头剥离组织,越薄越好,大小在0.5cm×0.5cm即可。
(4)自然晾干待用
2.甲苯胺蓝染色显示肥大细胞
(1)固定:取晾干的铺片于A-F固定液中固定5min
(2)水洗:取固定后的铺片于细水冲洗1min
(3)染色:将冲洗后的铺片入0.5%甲苯胺蓝染色液中染色30min
(4)水洗:取染色后的铺片于细水冲洗2min
(5)分色:入1%的冰醋酸中数秒
(6)水洗:取分色后的铺片于细水冲洗2min
(7)镜检:显微镜下观察(脱水、透明、中性胶封片后效果更佳)
(1)断颈法处死小鼠
(2)解剖小鼠取结缔组织
(3)将组织铺于干净的载玻片上,用废旧针头剥离组织,越薄越好,大小在0.5cm×0.5cm即可。
(4)自然晾干待用
2.甲苯胺蓝染色显示肥大细胞
(1)固定:取晾干的铺片于A-F固定液中固定5min
(2)水洗:取固定后的铺片于细水冲洗1min
(3)染色:将冲洗后的铺片入0.5%甲苯胺蓝染色液中染色30min
(4)水洗:取染色后的铺片于细水冲洗2min
(5)分色:入1%的冰醋酸中数秒
(6)水洗:取分色后的铺片于细水冲洗2min
(7)镜检:显微镜下观察(脱水、透明、中性胶封片后效果更佳)
来源:丁香实验