材料与仪器
大肠埃希氏菌 产气肠杆菌 普通变形杆菌 枯草芽孢杆菌
NaOH溶液 肌酸 甲基红试剂 吲哚试剂 乙醚 溴甲基酚紫指示剂
超净工作台 恒温培养箱 高压灭菌锅 试管 移液管 杜氏小套管 葡萄糖蛋白胨水培养基 蛋白胨水培养基 糖发酵培养基
NaOH溶液 肌酸 甲基红试剂 吲哚试剂 乙醚 溴甲基酚紫指示剂
超净工作台 恒温培养箱 高压灭菌锅 试管 移液管 杜氏小套管 葡萄糖蛋白胨水培养基 蛋白胨水培养基 糖发酵培养基
步骤
1. 试管标记 取分别装有不同糖类(如葡萄糖、蔗糖和乳糖等)发酵培养液的试管,根据需要培养的细菌做好标记(如大肠埃希菌、产气肠杆菌、普通变形菌等和空白对照)。
2. 接种培养 以无菌操作分别接种少量菌苔至以上各相应试管中,空白对照中不接种,置37℃恒温箱中培养,分别在培养24h、48h和72h观察结果。
3. 观察记录 培养后各发酵管与空白对照相比,若接种培养液保持原有颜色,其反应结果为阴性,表明该菌不能利用该种糖,记录用“-”表示;如培养液呈黄色,反应结果为阳性,表明该菌能分解该种糖产酸,记录用“+”表示。培养液中的杜氏小管内有气泡为阳性反应,表明该菌分解糖能产酸并产气,记录用“+”表示;如杜氏小管内没有气泡为阴性反应,记录用“-”表示。
2. 接种培养 以无菌操作分别接种少量菌苔至以上各相应试管中,空白对照中不接种,置37℃恒温箱中培养,分别在培养24h、48h和72h观察结果。
3. 观察记录 培养后各发酵管与空白对照相比,若接种培养液保持原有颜色,其反应结果为阴性,表明该菌不能利用该种糖,记录用“-”表示;如培养液呈黄色,反应结果为阳性,表明该菌能分解该种糖产酸,记录用“+”表示。培养液中的杜氏小管内有气泡为阳性反应,表明该菌分解糖能产酸并产气,记录用“+”表示;如杜氏小管内没有气泡为阴性反应,记录用“-”表示。
来源:丁香实验