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间接凝集抑制法

相关实验:妊娠测定实验

最新修订时间:

原理

将待测样品与己知抗体混合并作用一定时间后,再将其与相应抗原致敏的乳胶颗粒混合,如待测样品中含有相应抗原,便可与加入的抗体结合。当再加入致敏乳胶颗粒后,就没有相应的抗体与乳胶颗粒表面的抗原结合,因而就不出现凝集现象,此为乳胶凝集抑制反应,所以不发生凝集者为阳性,表明待测样品中含有相应抗原;发生凝集者为阴性,提示待测样品中无相应抗原。

材料与仪器

待检尿液 孕妇 HCG 阳性尿液
吸附 HCG 聚苯乙烯乳胶抗原 兔抗人 HCG 免疫血清(抗体) 生理盐水
载玻片(或黑色凹板) 滴管 牙签 特种铅笔 光学显微镜

步骤

1.  取玻片一张置实验台上,用特种铅笔将其划分为三格,并注明1,2,3。

2.  用滴管吸取盐水一滴加至第2 格,然后取待测孕妇尿一滴加至第1 格中,另吸取阳性孕妇尿一滴加至第3 格。

3.  于第1,2,3三格中各滴加一滴兔抗人HCG 免疫血清,分别用牙签将反应液充分搅拌混匀,静置30 s 至1 min。

4.  于第1,2,3 格中各滴加一滴HCG 致敏的乳胶抗原,分别用牙签搅拌混匀,静置l0 min 左右观察结。
 
 结果:

第1 格出现均匀一致的细小凝集颗粒者为阴性(非妊娠尿);如仍为均匀乳胶液体不凝者为阳性(妊娠尿)。

注意事项

1.  所用诊断试剂必须在有效期内使用,用前应充分摇匀。

2.  滴管和搅拌反应液的牙签不能共用。

3.  加样不宜过多,玻片应平置,以防两格反应液溢流相混。

4.  如肉眼观察不够清楚,可将玻片置于显微镜下用低倍镜观察。

来源:丁香实验

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