材料与仪器
步骤
1. 取肝素或EDTA抗凝全血(100μl/份),置12×75mm专用塑料试管中。
2. 加入50μl特异的单克隆抗体(一抗),室温下孵育30min。
3. 置Q-PREP仪上溶解红细胞,稳定和固定白细胞。
4. 离心(800~1000rpm,5min)弃上清液,用PBS洗涤细胞2次。
5. 加入50μl荧光(FITC或PE)标记的第二抗体,室温下避光染色30min。
6. 上流式细胞仪检测。
2. 加入50μl特异的单克隆抗体(一抗),室温下孵育30min。
3. 置Q-PREP仪上溶解红细胞,稳定和固定白细胞。
4. 离心(800~1000rpm,5min)弃上清液,用PBS洗涤细胞2次。
5. 加入50μl荧光(FITC或PE)标记的第二抗体,室温下避光染色30min。
6. 上流式细胞仪检测。
注意事项
1. 新鲜全血一般室温下放置8小时以内可以使用,时间过长会使活性降低,影响测定结果。
2. 抗凝血应保证无血块凝集。
3. 全血加入试管中时,应尽量避免加到试管壁上,如沾到了管壁上必须用用棉签擦净,否则会影响细胞二维点图的细胞群的分离效果。
2. 抗凝血应保证无血块凝集。
3. 全血加入试管中时,应尽量避免加到试管壁上,如沾到了管壁上必须用用棉签擦净,否则会影响细胞二维点图的细胞群的分离效果。
来源:丁香实验