原理
1. 中性红为指示剂,在酸性时呈红色,在碱性时呈淡黄色,一般肠道致病菌不分解乳糖,但分解蛋白胨,产生碱性物质,故菌落呈淡黄色。大肠杆菌发酵乳糖,产酸使指示剂变红,故菌落呈红色,中性红可被光线破坏,应将培养基保存于暗处。
2. 枸橼酸钠和煌绿能抑制大肠杆菌的生长,枸橼酸钠不抑制肠道致病菌。煌绿和中性红对细菌都有一定的毒性。硫代硫酸钠能中和中性红,煌绿的毒性,且能使大肠杆菌的红色菌落颜色鲜明。枸橼酸铁也能中和中性红,煌绿的毒性作用。胆盐与枸橼酸钠,硫代硫酸钠合用时,能加强对大肠杆菌的抑菌作用,而胆盐又能促进沙门菌的生长。
2. 枸橼酸钠和煌绿能抑制大肠杆菌的生长,枸橼酸钠不抑制肠道致病菌。煌绿和中性红对细菌都有一定的毒性。硫代硫酸钠能中和中性红,煌绿的毒性,且能使大肠杆菌的红色菌落颜色鲜明。枸橼酸铁也能中和中性红,煌绿的毒性作用。胆盐与枸橼酸钠,硫代硫酸钠合用时,能加强对大肠杆菌的抑菌作用,而胆盐又能促进沙门菌的生长。
材料与仪器
肉膏液琼脂;乳糖;枸橼酸钠;硫代硫酸钠;枸橼酸铁溶液;中性红水溶液;煌绿水溶液;胆盐
步骤
加热溶化已灭菌的肉膏液琼脂,再加入乳糖,枸橼酸钠,硫代硫酸钠,胆盐,枸橼酸铁,使其趁热全部溶解,矫正pH至7.0 -7.2,过滤,并补足失去水份,继续煮沸10分钟后,加入煌绿,中性红溶液,摇匀,倾注于灭菌平皿中。
来源:丁香实验