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极限培养基配制实验

相关实验:极限培养基配制实验

最新修订时间:

材料与仪器

水 Na2HPO4 KH2PO4 NH4Cl 抗生素
玻璃瓶 烧瓶

步骤

1.  在一个2L烧瓶中,将如下配方中的各成分加入水中, 加热搅拌直至其溶解。

(1)5 X M9培养基,每升    
                          
30 g Na2HPO4   

15 g KH2PO4   
            
5 g NH4Cl    
                     
2.5 g NaCl    
                    
15 mg CaCl2 (可加可不加)    

(2) 5 X M63培养基,每升

10 g (NH4)2SO4

68 g KH2PO4

2.5 mg FeSO4 • 7H2O

用KOH调pH至7. 0
 
(3) 5 X A培养基,每升

5 g (NH4)2SO4

20.5 gKH2PO4

52. 5 g K2 HPO4

2.5 g 二水柠檬酸


(4) 1 X 培养基


用无菌水稀释5X培养基,并且每升加人以下无菌溶液

1 ml 1 mol/L MgSO4 • 7H20

10 ml  20%碳源(糖或甘油)

2.  倒入玻璃瓶中,拧松盖子,于15 lb/in高压灭菌15 min。

3.  待培养基冷却至50°C以下(在这个温度时,手持瓶子可感觉热但能握得住),再加人其他补充成分和抗生素,玻璃瓶冷却至40°C以下,盖紧盖子。


4.  可于室温无限期保存。 




 

常见问题

1.   如果需要还可加入以下溶液
 
0. 1 ml 0.5%维生素B1(硫胺素)

5 ml 20% 酪蛋白水解物(casami­no acid)(Difco)或L-氨基酸至40 μg/ml或 DL-氨基酸至80 μg/ml

来源:丁香实验

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