原理
兔离体主动脉条实验可用于观察药物对血管平滑肌舒缩功能的影响。观察药物对由高钾去极化和去甲肾上腺素处理后主动脉条的作用,可以初步分析药物对血管平滑肌细胞的作用部位:是通过电压依赖性钙通道,还是受体操纵性钙通道。
材料与仪器
家兔
氯化钾 克氏液 哌唑嗪 去甲肾上腺素
Powerlab 张力换能器 兔台 手术器械 纱布 棉球 恒温水浴箱 浴管 注射器 4号针头 5号针头
氯化钾 克氏液 哌唑嗪 去甲肾上腺素
Powerlab 张力换能器 兔台 手术器械 纱布 棉球 恒温水浴箱 浴管 注射器 4号针头 5号针头
步骤
1. 制备兔主动脉条。家兔一只,猛击头部致昏,迅速剖胸,分离胸主动脉,于近心端及远心端在膈肌处剪断,迅速置于充氧的克氏液中,剔除血管外结缔组织及脂肪,洗去凝血块,轻轻套在与之同样粗细的玻璃棒上,然后用眼科剪将主动脉剪成宽3~4 mm、长2~3 cm的螺旋形条片。两端分别穿线结扎,置于麦氏浴管内,其中一端接在水浴管内的L 型管上,另一端连在张力换能器上,张力换能器的前负荷为2 g。调节水浴温度达37±1 ℃。麦氏浴管内充有30 ml 克氏液,并通95%O2及5%CO2的混合气体。将记录仪与张力换能器连接并调整零点。
2.待主动脉条稳定约1 小时后,描记其正常张力曲线,按如下顺序给药:
(1) 加入3×10-3 mol/L noradrenaline 0.1 ml,待最大反应后,冲洗标本。
(2) 待主动脉条恢复后,加入10-2 mol/L prazosine 0.2 ml,15 分钟后,重复(1)。待作用稳定后,冲洗标本。
(3) 管内加入4 mol/L potassium chloride 0.1 ml,待作用明显后冲洗。
(4) 曲线平稳后加入10-2 mol/L prazosine 0.2 ml,15 分钟后重复(3)。
2.待主动脉条稳定约1 小时后,描记其正常张力曲线,按如下顺序给药:
(1) 加入3×10-3 mol/L noradrenaline 0.1 ml,待最大反应后,冲洗标本。
(2) 待主动脉条恢复后,加入10-2 mol/L prazosine 0.2 ml,15 分钟后,重复(1)。待作用稳定后,冲洗标本。
(3) 管内加入4 mol/L potassium chloride 0.1 ml,待作用明显后冲洗。
(4) 曲线平稳后加入10-2 mol/L prazosine 0.2 ml,15 分钟后重复(3)。
注意事项
1. 制备主动脉条标本时操作要轻柔,切勿用力牵拉,以免损害主动脉的平滑肌组织。
2. 克氏液必须临时新鲜配制。
3. 向浴管内通入混合气体时,注意通气量,一般为40~60 个气泡/分钟。
2. 克氏液必须临时新鲜配制。
3. 向浴管内通入混合气体时,注意通气量,一般为40~60 个气泡/分钟。
来源:丁香实验