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标本制备法

相关实验:哌唑嗪对离体血管平滑肌的作用实验

最新修订时间:

原理

兔离体主动脉条实验可用于观察药物对血管平滑肌舒缩功能的影响。观察药物对由高钾去极化和去甲肾上腺素处理后主动脉条的作用,可以初步分析药物对血管平滑肌细胞的作用部位:是通过电压依赖性钙通道,还是受体操纵性钙通道。

材料与仪器

家兔
氯化钾 克氏液 哌唑嗪 去甲肾上腺素
Powerlab 张力换能器 兔台 手术器械 纱布 棉球 恒温水浴箱 浴管 注射器 4号针头 5号针头

步骤

1.  制备兔主动脉条。家兔一只,猛击头部致昏,迅速剖胸,分离胸主动脉,于近心端及远心端在膈肌处剪断,迅速置于充氧的克氏液中,剔除血管外结缔组织及脂肪,洗去凝血块,轻轻套在与之同样粗细的玻璃棒上,然后用眼科剪将主动脉剪成宽3~4 mm、长2~3 cm的螺旋形条片。两端分别穿线结扎,置于麦氏浴管内,其中一端接在水浴管内的L 型管上,另一端连在张力换能器上,张力换能器的前负荷为2 g。调节水浴温度达37±1 ℃。麦氏浴管内充有30 ml 克氏液,并通95%O2及5%CO2的混合气体。将记录仪与张力换能器连接并调整零点。
 
2.待主动脉条稳定约1 小时后,描记其正常张力曲线,按如下顺序给药:
 
(1) 加入3×10-3 mol/L noradrenaline 0.1 ml,待最大反应后,冲洗标本。
 
(2) 待主动脉条恢复后,加入10-2 mol/L prazosine 0.2 ml,15 分钟后,重复(1)。待作用稳定后,冲洗标本。
 
(3) 管内加入4 mol/L potassium chloride 0.1 ml,待作用明显后冲洗。
 
(4) 曲线平稳后加入10-2 mol/L prazosine 0.2 ml,15 分钟后重复(3)。

注意事项

1.  制备主动脉条标本时操作要轻柔,切勿用力牵拉,以免损害主动脉的平滑肌组织。
 
2.  克氏液必须临时新鲜配制。
 
3.  向浴管内通入混合气体时,注意通气量,一般为40~60 个气泡/分钟。

来源:丁香实验

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