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高氏I号培养基制备

相关实验:高氏I号培养基的制备实验

最新修订时间:

原理

高氏I号培养基是用来培养和观察放线菌形态特征的合成培养基。如果加人适量的抗菌药 物(如各种抗生素、酚等),则可用来分离各种放线菌。此合成培养基的主要特点是含有多种化学成分已知的无机盐,这些无机盐可能相互作用而产生沉淀,如高氏I号培养基中的磷酸盐和镁盐相互混合时易产生沉淀,因此,在混合培养基成分时,一般是按配方的顺序依次溶解各成分,甚至有时还需要将二种或多种成分分别灭菌,使用时再按比例混合。此外,合成培养基有的还要补加微量元素,如高氏I号培养基中的FeS04 ·7H2O的量只有0.001%,因此在配制培养基时需预先配成髙浓度的FeS04 ·7H2O贮备液,然后再按需加人一定的量到培养基中。

材料与仪器

步骤

一、高氏I号培养基配方
 
 
二、器材
 
1.  溶液或试剂

可溶性淀粉,KNO3,NaCl,琼脂,K2HPO4 ·3H2O,MgS04·7H2O,FeS04·7H2O,1 mol/L NaOH,1 mol/L HCl。
 
2.  仪器或其他用具

试管,三角烧瓶,烧杯,量筒,玻棒,培养基分装器,天平,牛角匙,高压蒸气灭菌锅,pH试纸(pH 5.0-9.0),棉花,牛皮纸,记号笔,麻绳或橡皮筋,纱布等。
 
三、操作步骤
 
1.  称量和溶化
 
(1)按配方先称取可溶性溶粉放人小烧杯中,并用少量冷水将淀粉调成糊状,再加人少于所需水量的沸水中,继续加热,使可溶性淀粉完全溶化。

(2)然后再称取其他各成分依次逐一溶化。

(3)对微量成分FeS04 ·7H2O可先配成高浓度的贮备液按比例换算后再加人,方法是先在100 ml水中 加人1 g的FeS04 ·7H2O配成0.01 g/ml,再在1000 ml培养基中加1 ml的0.01 g/ml的贮备液即可。

(4)待所有药品完全溶解后,补充水分到所需的总体积。如要配制固体培养基,其溶化过程同牛肉膏蛋白胨培养基制备实验
 
 
2.  pH调节、分装、包扎、灭菌及无菌检査

牛肉膏蛋白胨培养基制备实验
 
 
 

来源:丁香实验

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